ня середовищ, з вирощування культур
ІнгредіентиМ641 грамм/літрМ369 грамм/літрПротеозопептон10, 0010,00 М'ясний екстракт10, 0010,00 Дріжджовий екстракт5, 005,00 Глюкоза20, 0020,00 Твін - 801,001,00 Амонію цітрат2, 002,00 Натрію ацетат5, 005,00 Магнію сульфат0, 100 , 10Марганца сульфат0, 050,05 Натрію гідрофосфат2, 002,00 Агар-агар12 ,00-Кінцеве значення рН (при 25 ° С) 6,5 ± 0,2 ** Склад вивірено і доведений до відповідності необхідним параметрам.
Приготування: розмішати 67,15 г порошку М641 або 55,15 г порошку М369 в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Розлити в пробірки або флакони. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм. (121 ° С) протягом 15 хв.
Малюнок 6-Лактобактерии
Принцип і оцінка результату:
На цій культурі рясно ростуть лактобактерії з ротової порожнини, молочних продуктів, інших харчових продуктів, фекалій та іншого матеріалу.
Протеозопептон і м'ясної екстракт є джерелом необхідних поживних речовин, глюкоза - ферментіруемие субстратом і джерелом енергії. Дріжджовий екстракт забезпечує вітамінами групи В. Твін - 80 є джерелом жирних кислот, необхідних для росту лактобактерій. Ацетат натрію і цитрат амонію пригнічують ріст стрептококів, пліснявих грибів і багатьох інших мікроорганізмів.
Все це розливається на чашки Петрі в стерильних умовах, додається 1 мл розведеного стерильною водою (попередньо розтертого в ступці з піском або склом) шлунково-кишкового тракту риби, розтирається шпателем по поверхні застиглої середовища і залишається на 1-5 діб (залежно від бактерій) при температурі 20-25 градусів. Після того, як колонії на чашках Петрі виростуть, кожну з них (крім явно однакових) пересіяти на нові чашки методом истощающего штриха. Так були отримані чисті колонії і при мікроскопірованіі та визначенні всяких різних біохімічних особливостей з певною часткою впевненості можна сказати, що серед виросли колоній з кишечника риби зустрілися ті, які були у складі пробіотика.
Також треба з'ясувати їх забарвлення по граму, так як лактобактерії відносяться до грам позитивним бактеріям.
Метод забарвлення: робиться мазок чистої культури клітин у краплі води, потім На фіксований мазок піпеткою наносять кілька крапель барвника, водним розчином фуксину забарвлюють 1 - 2 хв, метиленовим блакитним - 2-3 хв. Барвник змивають водою. Даний метод фарбування дозволяє побачити форму мікроорганізмів і їх розташування.
Висушування мазка; фіксація; забарвлення Феноловий генціанвіолетом - 2-3 хв.; обробка розчином Люголя (1,0 йоду; 2,0 йодистого калію і 300,0 дестілірованной води) - 2-3 хв., знебарвлення 70 ° спиртом до сіро-сталевого кольору (колір диму цигарки) - близько 10 сек.; промивання водою; фарбування контрастною фарбою (водним розчином сафраніну, розчином еозину або фуксином) протягом 2-3 хв.; обмивання водою; висушування фільтрувальної папером. Грампозитивні мікроби фарбуються в темно-фіолетовий колір, а грамнегативні - в красний.Наблюденія за стерляддю тривали і протягом року після завершення дослідів. Дані отримані за цей період наведені в таб. 10.
Наприкінці спостережень, приблизно в кінці травня, ми відправили майже всю річну стерлядь, в природний водойму.
