я з фоном і зазвичай приймається рівною триразовому перевищенню фону даного приладу. Якщо у вашому «епохальному» експерименті активність «головного» зразка ледь-ледь перевищує фон, спробуйте збільшити час вимірювання (можна до 20 хв.) - тоді достовірність вимірювання зросте.
У більшості випадків в life science абсолютні вимірювання активності не потрібні, і набагато важливіше отримати інформацію про відносну активності зразків: розподіл активності по гелю, хроматографічної платівці чи по елюіровать з колонки продуктам; частка субстрату, який перетворився на продукт під дією ферменту; частка ліганда, пов'язаного з рецептором; детекція продуктів метаболізму з'єднання, міченого радіонуклідом, та інші аналогічні завдання. Тому дуже важливо, щоб умови приготування і вимірювання зразків у конкретному експерименті були однаковими, тоді абсолютні похибки у вимірюваннях не зроблять істотного впливу на біологічні результати.
Найбільш яскраво цю відносність вимірювань ілюструє широке використання мінімоніторов - приладів, призначених для визначення забруднення поверхонь робочих столів, одягу і т.д. Невеликі кишенькові прилади, що мають іонізаційний лічильник (зазвичай це іонізаційна камера або лічильник Гейгера), виявилися дуже зручними для?? Етекціі меченного фосфором - 32 фрагмента ДНК в агарозному гелі або меченного йодом - 125 білка в ПААГ і т.п. Деякі примудряються за показаннями такого приладу оцінювати включення мічених попередників біосинтезу в біополімери після поділу продуктів реакції, використовують монітори для вимірювання активності зразків на фільтрах, шматках фільтрувальної або хроматографічного паперу і навіть у пробірках. Це зручно і корисно для якісних і напівкількісних оцінок, але слід пам'ятати, що приладові помилки в таких вимірах можуть бути дуже значними і досягати 200-300%.
Рідинні сцинтиляційні лічильники вже багато років залишаються головним інструментом для кількісного виміру радіонуклідів. Незважаючи на різноманітність конструкцій, з точки зору користувача, всі вони вимірюють активність зразків, поміщених в спеціальний скляний або пластиковий флакон і заповнений рідким сцинтилятором. Оскільки вимір активності зводиться до підрахунку спалахів світла, рідина у флаконі повинна бути прозора для рахунку і гомогенна за складом. Всі відхилення від цієї вимоги знижують ефективність рахунки, причому іноді істотно. Утворення осаду або двофазної не змішується рідкої системи, наявність зразків біологічних тканин або фільтрувальних матеріалів - всі ці фактори знижують ефективність рахунку. Те ж саме стосується добавок багатьох хімічних речовин: кислот, лугів, концентрованих розчинів цукрів, солей, сечовини і багато іншого. Особливо це стосується вимірювань тритію, де різниця в ефективності рахунки для гомогенного, майже ідеального, зразка і зразка, нанесеного на хроматографический сорбент, може бути в 10? 30 разів і навіть більше. Це необхідно враховувати, якщо при складанні балансу за активністю раптом кудись зникне частина радіоактивного матеріалу або звідкись раптово з'явиться «зайве».
Склади сцинтиляторів дуже різноманітні і фірми, що виробляють сцинтиляційні коктейлі, часто не розкривають їх склад. Класичний (чи не найбільш перший) рідкий сцинтилятор - це толуольного розчин 2,5-діфенілоксазола (РРО) з добавкою 1,4-ді-[2-феніл-(5-окзазоліл)]-бензолу (РОРОР). Склад: 4 г РРО та 0,2 г РОРОР на 1 л толуолу. Не ...
