на в 1988 році Танакой, карасів і Хілленкампом. З тих пір він став широко поширеним методом для пептидів, білків і більшості інших біомолоекул (олігонуклеотидів, вуглеводів, природних речовин і ліпідів). Ефективний і спрямований перенесення енергії під час акту індукованої лазером десорбції за допомогою матриці призводить до великого виходу іонів незачепленою аналіту і дозволяє проводити вимірювання сполук з субпікомолярной чутливістю. До того ж, зручність MALDI для аналізу гетерогенних зразків робить його дуже привабливим для мас-аналізу складних біологічних зразків, як, наприклад, гідролізат білків.
В
p> Хоча точний механізм десорбції/іонізації для MALDI невідомий, прийнято вважати, що MALDI викликає іонізацію і переклад зразка з конденсованої фази в газову допомогою лазерного збудження та індивідуалізації молекул зразка з матриці (Рис. 1.14). У MALDI аналізі аналіт спочатку сокрісталлізуется з великим молярним надлишком матричного з'єднання, зазвичай УФ-поглинаючої слабкою органічною кислотою. Опромінення такої суміші аналіту з матрицею лазером призводить до випаровування матриці, яка несе аналіт в собі. Матриця грає ключову роль в цьому методі. Сокрісталлізованние молекули зразка також випаровуються, але без прямого поглинання енергії лазера. Молекули, чутливі до лазерного випромінювання, тому захищені від прямого збудження УФ-лазером. p> Матриця MALDI - нелеткий твердий матеріал, забезпечує процеси десорбції і іонізації допомогою поглинання лазерного випромінювання. Як результат, і матриця, і будь-який зразок, вбудований в неї, випаровуються. Матриця також служить для того, щоб мінімізувати збиток зразком від лазерного випромінювання, поглинаючи велику частину падаючої енергії.
Опинившись в газовій фазі, десорбувати заряджені молекули потім електростатично направляються з MALDI пристрої іонізації в мас-аналізатор. Времяпролетного (TOF) мас-аналізатори часто використовуються для розділення іонів по відношенню маси до заряду ( m / z ). Імпульсна природа MALDI дуже зручна для TOF аналізаторів, тому що початковий момент часу можна засікати як момент лазерного імпульсу.
Було розроблено кілька теорій для пояснення десорбції за допомогою MALDI. Модель термічних піків припускає, що викид непошкоджених молекул обумовлений слабким коливальним взаємодією між матрицею і аналітом, що мінімізує перенесення коливальної енергії від матриці до модам молекул аналіту, тим самим мінімізуючи фрагментацію. Теорія імпульсного тиску припускає, що створюється градієнт тиску, перпендикулярний поверхні, і десорбція великих молекул викликана передачею імпульсу при їх зіткненнях з швидко рухомими молекулами матриці. Зазвичай вважається, що іонізація відбувається за допомогою передачі протона або катіонізаціі під час процесу десорбції.
Корисність MALDI для аналізу біомолекул заснована на її здатності давати інформацію про молекулярному вазі непошкоджених ...
