одають при контакті води з недостатньо чистої апаратурою, полімерними пробками і шлангами, мастилами на органічній основі і т.д. Крім того, багато органічні речовини, малолетучие самі по собі, здатні легко переганятися з водяною парою і, отже, забруднювати конденсат. Найбільш надійним методом очищення води для ГВЕЖХ слід визнати двократну дистиляцію в скляній або кварцовою апаратурі на шліфах, при цьому на першій стадії проводиться окислення домішок перманганатом калію, а на другий - обробка лугом для видалення кислих речовин. Якщо після цього необхідне додаткове очищення, її проводять пропусканням води через колонку великого діаметру з великим (30-100 мкм) обернено-фазним сорбентом, використовуваним для препаративної роботи та відносно дешевим. Зберігати таку ВИСОКОЧИСТИХ воду бажано в темному місці в бутлі, ретельно закритою пробкою. Вода не повинна контактувати з полімерами, що виділяють в неї продукти деструкції, стабілізатори, пластифікатори та інші забруднювачі. Бажано не зберігати ВИСОКОЧИСТИХ воду тривалий термін, так як її чистота зберігається відносно недовго.
Інші розчинники для ГВЕЖХ повинні бути кваліфікації В«для УФ-спектроскопіїВ» або В«для рідинної хроматографії В». Виробництво ацетонітрилу і метанолу, а також води таких кваліфікацій освоєно нашою промисловістю. При зберіганні, а також використанні таких розчинників завжди слід пам'ятати про потенційні забруднювачі та по мірі можливості уникати їх.
Домішки, що знаходяться в метанолі або ацетонітрилі, точно так само можуть накопичуватися на колонці і проявлятися у вигляді піків при градієнті. Це легко зрозуміти, якщо уявити собі, що початковий склад розчинника органічний компонент - вода 50: 50. Невимиваемий таким розчинником домішка, наприклад нафталін, може бути додана як у воду, так і в метанол і буде накопичуватися на початку колонки однаково незалежно від компонента системи розчинників, що її містить (Метанолу або води). Якщо через якийсь час почати градієнтне елюювання, нафталін при більш сильному розчиннику почне рухатися і вийде у вигляді вузького піку.
Найбільш жорсткі вимоги пред'являють до розчинника якщо градієнт здійснюється з детектуванням при довжинах хвиль нижче 220 або 210 нм, так як в цьому випадку поглинають і проявляються у вигляді піків багато домішки, УФ-прозорі при 254 або 280 нм.
Єдиним шляхом встановлення придатності розчинників для ГВЕЖХ служить перевірка в реальних хроматографічних умовах з градієнтом необхідного складу, але без введення проби речовини (холостий градієнт). Як правило, перевірку проводять спочатку на більш грубих шкалах детектора і при довжинах хвиль 254 або 280 нм, а при отриманні позитивного результату переходять на більш чутливі шкали і довжини хвиль 220 нм і нижче. Якщо робота за ГВЕЖХ перервана на відносно великий термін (Більше тижня) або один з розчинників (або обидва) замінені на нові (навіть тієї ж кваліфікації і партії), завжди слід до початку роботи із зразками створити хол...
