остий градієнт для перевірки працездатності системи в цілому.
Слід зазначити, що багато добавки до розчинників, такі, як солі, кислоти, іон-парні та інші реагенти, здатні помітно змінити властивості розчинників. Так, накопичення поліфосфатів в солях фосфорної кислоти, використовуваних для приготування буферних розчинів, призводить до істотного дрейфу при градієнті через сильний УФ-поглинання поліфосфатів. У деяких випадках вдається зменшити дрейф в градієнтному режимі, якщо зрівняти УФ-поглинання слабкої і сильної
елююють розчинів добавкою УФ-поглинача, такого, як ацетон, до менш УФ-вбирного розчину. Градієнт тим легше здійснити, ніж він менше за діапазоном, тому доцільно змінювати розчинник за складом тільки в тих межах, які необхідні для розділення. Це дозволяє підвищити чутливість, зменшити дрейф нульової лінії і кількість помилкових піків, а також прискорити як елюювання, так і повернення системи до вихідних умов для нового аналізу.
Якщо при градієнтному Елюювання використовують інший тип детектора, наприклад флюоріметріческій, високі вимоги до чистоти розчинників залишаються, але змінюється їх спрямованість - не повинно бути флюоресцирующих домішок. Про придатність розчинників для роботи судять також, здійснюючи холостий градієнт.
На закінчення відзначимо, що до градиентному Елюювання слід вдаватися тільки в тих випадках, коли його застосування є єдиним шляхом вирішення даної проблеми. Якщо перевірка в градієнтному режимі показала, що можливо використовувати ізократіческій варіант для цікавлять. речовин, слід негайно перейти до нього. Це завжди вигідно, навіть у тих випадках, коли аналіз розбивається на два ізократічеокіх, виконуваних на двох приладах з більш сильним і більш слабким розчинниками. Більш відтворювані результати і можливість використовувати більш чутливі шкали, менш жорсткі вимоги до якості розчинника - це тільки деякі з одержуваних переваг.
Слід також зазначити, що при роботі в обернено-фазному режимі з системою метанол - вода, в'язкість якої не аддитивна, а змінюється від 1 до 1,5 і потім до 0,6 Мпа • с при переході від 100% води до 100% метанолу, колонка знаходиться в несприятливих умовах, так як при постійній витраті тиск на колонку спочатку зростає в 1,5 рази, а потім падає в 2 рази до кінця градієнтного елюювання. Картина повторюється в процесі регенерації колонки, при поверненні до слабкого розчинника. Це скорочує термін служби колонки і ускладнює роботу з колонками, що містять невеликий сорбент (менше 5 мкм).
Література
1. Barth H.G./J. Chromatogr. Sci, 1980, v. 18, No. 9, p. 409-429. p> 2. Бєлєнький Б.Г., Мальцев В.Г.// В кн.: Прикладна хроматографія. М., Наука, 1984, с. 54-64. p> 3. Ентеліс С.Г., Євреїнов В.В., Кузаєв А.І. Реакційноздатні олі-Гомера. М, Хімія, 1985. p> 4. Janca J., Kleparnik K./J. Liquid Chromatogr., 1982, v. 5, No. 2, p. 193 - 216. p> 5. Chamberlin T.A., Tulnstra H.E./An...
