падок 2. Лімітування каталітичним розщепленням субстрату. p> У разі, коли розщеплення йде значно повільніше освіти гетеродуплекса, можна вважати, що встигає встановитися рівновага:
В
рівноважної концентрацією гетеродуплекса можна знехтувати в порівнянні з константою Міхаеліса у вираженні швидкості:
В
Записавши вираз константи рівноваги K1 і рівняння матеріального балансу для М і О, отримуємо досить умов для вирішення рівняння:
В
де [A] - рівноважна концентрація, СА 0 - вихідна концентрація речовини.
З урахуванням (17) і (18), отримуємо вирази рівноважних концентрацій H і O:
В
Підставляючи (21) в рівняння Міхаеліса - Ментен (16), отримуємо модифіковане рівняння швидкості реакції:
В
Підставляючи вирази (20), (21) і (22) у (12) і опускаючи громіздкі проміжні розрахунки, отримуємо вираз для швидкості каталітичного розщеплення мРНК:
В
звідки неважко знайти формулу ефективної константи швидкості брутто-процесу:
В
На шляху створення ліків на основі антисмислових ODN лежить безліч перепон: слабка здатність до інтерналізації, нестійкість до нуклеаз, токсичність та інші. Хімічні модифікації здатні усунути багато з цих проблем, але лише частково, і важко знайти компроміс між перевагами та недоліками якої модифікації. Незважаючи на це, багато препаратів на основі ODN пройшли випробування. Перше ліки на основі ODN - Vitravene, спрямоване на боротьбу з цитомегаловірусною інфекції у хворих на СНІД [2]. br/>
2. Матеріали і методи
.1 Реактиви, що використовуються в роботі
У роботі використовувалися такі реактиви: дезоксинуклеозидтрифосфатов, мінеральне масло виробництва фірми В«SigmaВ» (США), N, N'-метіленбісакріламід виробництва В«MP BiomedicalsВ» (Німеччина), акриламід виробництва В«SigmaВ» (США) з чистотою не менше 99%, агароза виробництва В«MP BiomedicalsВ» (Німеччина) (electrophoresis grade), трис виробництва фірм В«MP BiomedicalsВ» (Німеччина) (техн.) і В«ICN BiomedicalsВ» (США) (ultra pure grade), ЕДТА виробництва фірми В«ICN BiomedicalsВ» (США), борна кислота виробництва В«MP BiomedicalsВ» (Німеччина), сечовина виробництва MP Biomedicals В»(Німеччина), TEMED виробництваВ« Sigma В»(США), DTT виробництва фірмиВ« Fluka Chemica В»(Швейцарія), цітавлон, діпіріділдісульфід виробництва фірм В«Fluka ChemicaВ» (Швейцарія) і В«AldrichВ» (Німеччина), трифенілфосфін виробництва фірм В«Fluka ChemicaВ» (Швейцарія) і В«AldrichВ» (Німеччина), 2 - (N, N-диметиламіно)-піридин виробництва фірм В«Fluka ChemicaВ» (Швейцарія) і В«AldrichВ» (Німеччина), триетиламін виробництва фірми В«Sigma-AldrichВ» (США), Піренеї-1-метиламін, люб'язно наданий ..., солі хлорид магнію, хлорид натрію, хлорид кальцію, ацетат натрію , перхлорат літію персульфат амонію кваліфікації В«ОСЧВ», інші реактиви мали кваліфікацію не нижче В«хч...
