н використовують для розведення контрольних сироваток, випробовуваних проб, антивидові коньюгата і міжетапні промивки. p> Розчин № 2. Для приготування субстратного буфера 5,37 г дігидрофосфата натрію (флакон 6.1) розчиняють у 50 мл дистильованої води. Вміст флакона 6.2 (1,51 г лимонної кислоти) також розчиняють у 50 мл дистильованої води. Потім змішують 224,3 мл розчину натрію дігидрофосфата з 25,7 мл розчину лимонної кислоти, додають 50 мл дистильованої води. Отриманий розчин повинен мати рН = 4,9-5,0. При необхідності додають кислий чи лужний компоненти. p> Розчин № 3. У 0,5 мл розчину № 1 розчиняють 1,0 см3 цільної леофілізірованной позитивної сироватки проти хвороби Гамборо (флакон 1). Допускається зберігання отриманого розчину протягом 3 діб при 4 В° С.
Розчин № 4. У 0,5 мл розчину № 1 розчиняють 1,0 см3 цільної леофілізірованной негативної сироватки проти хвороби Гамборо (флакон 1). Допускається зберігання отриманого розчину протягом 3 діб при 4 В° С.
Розчин № 5 Вміст розчину 4 з антивидові кон'югатом розчиняють в 0,5 мл розчину № 1. Для отримання робочого розведення 1:200 з цього флакона відбирають 0,05 см3 на 10,0 мл розчину № 1 (на 1 планшет). Готують перед вживанням. Зберіганню не підлягає. p> Розчин № 6. Одну таблетку гідропериту розчиняють у 20 мл дистильованої води. Зберігають у захищеному від світла місці при 4 В° С не більше 20 діб. p> Розчин № 7. Субстратної-індикаторна суміш. Таблетку ортофенілендіамін (субстрату) розчиняють у 20 мл розчину № 2, струшують до повного розчинення і додають на кожні 20 мл цього розчину по 0,4 мл розчину № 6. Зберіганню не підлягає. p> З комплекту набору беруть планшет, в лунках якого адсорбований очищений антиген вірусу хвороби Гамборо. Зразки досліджуваних проб сироваток крові розводять 1:100 розчином № 1. З цією метою до 0,01 мл сироватки додають 1 мл розчину № 1. p> В лунки рядів планшета В1-12 ... Н1-12 вносять по 0,1 мл розчину № 1, а в лунки А2-11 вносять по 0,2 мл розведених проб сироваток і проводять растітровку по вертикальних рядах, 1:100 до 1:12800. В лунки А1 і А12 вносять розведення 1:100 контрольних (негативної і позитивної) сироваток і також проводять растітровку по вертикальних рядах. З останніх лунок Н1 і Н12 видаляють по 0,1 мл. p> Планшет обережно струшують, закривають кришкою і переносять у термостат на 2 години при температурі 37 В° С. Потім лунки планшета звільняють від вмісту шляхом струшування і трикратно промивають розчином № 1. У всі лунки планшета вносять по 0,1 мл розчину № 5, поміщають в термостат на 1 год, трикратно промивають розчином № 1. Потім в усі лунки вносять по 0,1 мл розчину № 1. Залишають при кімнатній температурі на 10 хвилин. Реакцію зупиняють додаванням в кожну лунку 0,05 мл 0,5%-ного розчину сірчаної кислоти. p> Виявлення специфічних антитіл у сироватках крові можна проводити і без растітровкі досліджуваних сироваток. При цьому в усі лунки планшета А2-12 ... Н2-12 вносять по 1 мл сироваток крові в розведен...
