шар силікагелю на торці колонки і приєднати фітінг В«до інжектораВ».
8. Пропустити через колонку 200 мл абсолютного метанолу. p> 9. Поставити на колонку заглушки і табличку з її даними. p> Усі три методи дають можливість отримати колонки з силікагелем, заповнені однорідний і забезпечують високу ефективність розділення. З сорбентом зернения 10 мкм вдається отримати колонки довжиною 25 см, які мають ефективність зазвичай від 4 до 8 тис. т. т., що мають наведену висоту теоретичної тарілки від 3 до 6. При використанні наявних у продажі не дуже вузько сепарованих сорбентів це є гарним результатом. Якщо використовувати дуже вузькі фракції силікагелю і добре їх знепилити седиментацією, вдається отримати колонки з ефективністю до 12 тис. т. т., що мають наведену висоту теоретичної тарілки, що наближається до 2.
Значно складніше набивка колонок сорбентами з хімічно прищепленими фазами. Вибір методики заповнення колонок такими сорбентами засновують на використанні даних по набиванні фірми-виробника або застосовують оригінальні методики, описані в літературі.
Останні є найбільш надійними, але найчастіше не містять подробиць, і тому дають незадовільні результати при спробі їх відтворити. Так як хімія поверхні сорбентів з прищепленими фазами, особливо звернення-фазних, складна, можна обговорювати метод упаковки тільки конкретного сорбенту. Спроба застосувати описаний в літературі або використовувався дослідником метод упаковки іншого сорбенту В«з тієї ж хімічно прищепленої фазою на тій же матриціВ» (Наприклад, октадецілхлорсілан, щеплений до силікагель), як правило, призводить до невдачі і тільки як виняток - дає хороший результат.
Досвід автора підтверджує, що навіть для нових партій одного сорбенту тієї ж фірми може знадобитися серйозне коригування методики заповнення колонок, так як хімія їх поверхні різниться в деталях від партії до партії. Треба також враховувати той факт, що фірми, що виробляють та колонки, і сорбенти, які не зацікавлені у розголошенні секретів упаковки своїх сорбентів. Слід з обережністю ставитися до В«чудодійнимВ» рідин для приготування суспензій звернення-фазних та деяких інших сорбентів, склади яких не розкриваються фірмами-виробниками. Твердження про В«універсальностіВ» цих рідин для будь-якого обернено-фазної сорбенту і про отримання В«гарантовано високоефективних В»колонок є не більш, ніж рекламою. Вона нерідко вельми далека від реальних результатів, які вдається отримати, а відтворити їх склад в разі успіху (особливо якщо мова йде про повний склад) досить скрутно.
1.3 ЗАПОВНЕННЯ КОЛОНОК В«СУХИМВ» МЕТОДОМ
Заповнення колонок В«сухимВ» способом можливо тільки старими поверхнево-пористими (Пеллікулярнимі) сорбентами, що мають розмір частинок 35-60 мкм, а також пористими сорбентами на основі силікагелю з розміром частинок 25-40 мкм і більше. Колонки, заповнені сорбентами першого типу, мають невисоку ефективність по порівняно з колонками, заповненими сучасним...
