и сорбентами з розміром частинок 5-10 мкм, і мають малу ємність по пробі. Колонки з сорбентами другого типу також мають невисоку ефективність, але допускають значно більше навантаження пробій і застосовуються для препаративної роботи. Через дії поверхневих сил вдається ефективно упакувати колонку сухим способом мікрочастинками розміром 3-20 мкм. p> Заповнення колонок сухим способом проводять наступним чином.
1. Колонку ретельно промити розчинниками і висушити, приєднати кінцевий фітінг В«до детектораВ».
2. До вільного кінця колонки приєднувати (на різьбі або за допомогою гумової трубки) невелику воронку.
3. Засипати сорбент в колонку через лійку невеликими порціями, достатніми для заповнення колонки на 2-4 мм по висоті; колонку при цьому тримати вертикально.
4. Ущільнити сорбент, обережно постукуючи колонкою по дерев'яній поверхні, повільно обертаючи її і постукуючи дерев'яною паличкою по стінці колонки приблизно на рівні шару сорбенту. Постукувати колонкою кілька разів по дерев'яної поверхні без постукування по стінці.
5. Додати наступну порцію і повторювати всі операції, поки колонка не заповниться доверху.
6. Кілька хвилин обережно постукувати заповненої колонкою по дерев'яній поверхні, що не постукуючи по стінці.
7. Від'єднати лійку, вирівняти шар сорбенту і встановити фітінг В«до інжектору В».
Деякі автори рекомендують використовувати механічну вібрацію в комбінації з ручним обертанням і постукуванням по стінці колонки, інші - комбінувати механічну вібрацію і обертання на спеціальному стенді.
1.4 ТЕСТУВАННЯ І ОЦІНКА якість приготування КОЛОНОК
Приготовлені колонки тестують на модельній суміші речовин і стандартних розчинниках з метою оцінки їх якості.
Для тестування колонок c силікагелем, щепленими фазами В«нітрилВ» і В«діолВ» рекомендується розчинник гексан - ізопропанол (100:2 за обсягом), проба-по 0,5% (мас.) о-крезолу і фенолу в розчиннику. p> Для тестування колонок з обернено-фазними сорбентами (С2, C8 і C18) рекомендується розчинник метанол-вода або ацетонітрил-вода (70:30 за об'ємом), проба - по 0,5% (мас.) толуолу і n-ксилолу в метанолі (ацетонітрилі). Якщо компоненти проби виходять занадто швидко (для обернено-фазних сорбентів з малим вмістом прищепленої фази), розчинник слід замінити на новий із співвідношенням компонентів 50:50.
Нова колонка, як правило, містить розчинник набивання, що відрізняється від розчинника тестування за складом. Тому нову колонку встановлюють на хроматограф і подають розчинник тестування зі швидкістю 1 мл/хв для колонок діаметром 4,6 мм (стандартних, аналітичних). Час, протягом якого встановлюється рівновагу колонки з новим розчинником, визначається по стабільності нульової лінії детектора і параметрів утримування тест-речовин і зазвичай коливається від 1 до 2 ч. Після встановлення рівноваги вводять кілька разів тест-суміш і отримують тест-хроматограми.
...
