би, глюкокортикоїди, етанол, саліцилати.
Етанол інгібує глюконеогенез в печінці. Цей ефект спостерігається у всіх людей. У зв'язку з цим слід мати на увазі, що зловживання алкогольними напоями на тлі інсулінотерапії може призвести до розвитку важкого гіпоглікемічногостану. Невеликі кількості алкоголю, прийнятого разом з їжею, зазвичай не викликають проблем.
Бета-адреноблокатори можуть інгібувати секрецію інсуліну, змінювати метаболізм вуглеводів і збільшувати периферичну резистентність до дії інсуліну, що призводить до гіперглікемії. Однак вони можуть також інгібувати дію катехоламінів на глюконеогенез і глікогеноліз, що пов'язане з ризиком важких гіпоглікемічних реакцій у хворих на цукровий діабет. Більш того, будь-який з бета-адреноблокаторів може маскувати адренергическую симптоматику, викликану зниженням рівня глюкози в крові (у тому числі тремор, серцебиття), порушуючи тим самим своєчасне розпізнавання пацієнтом гіпоглікемії. Селективні бета1-адреноблокатори (у тому числі ацебутолол, атенолол, бетаксолол, бісопролол, метопролол) виявляють ці ефекти у меншій мірі.
НПЗЗ (нестероїдні протизапальні засоби) і високі дози саліцилатів інгібують синтез простагландину Е (який інгібує секрецію ендогенного інсуліну) і підсилюють таким чином базальну секрецію інсуліну, підвищують чутливість? - клітин підшлункової залози до глюкози; гіпоглікемічний ефект при одночасному застосуванні може зажадати коригування дози НПЗЗ саліцілатів та/або інсуліну, особливо при тривалому спільному використанні. [8, стр.40-42]
. 15 Отримання інсуліну
Інсулін людини можна виробляти чотирма способами:
повним хімічним синтезом;
екстракцією з підшлункових залоз людини (обидва ці способи не підходять через неекономічність: недостатньої розробленості першого способу і нестачу сировини для масового виробництва другим способом);
напівсинтетичним методом за допомогою ферментно-хімічної заміни в положенні 30 В-ланцюга амінокислоти аланіну в свинячому інсуліні на треонін (див. Прил. Е);
биосинтетическим способом по генно-інженерної технології. Два останніх методу дозволяють отримати людський інсулін високого ступеня очищення.
В даний час інсулін людини, в основному, отримують двома способами: модифікацією свинячого інсуліну синтетики-ферментативним методом і генно-інженерним способом.
Інсулін виявився першим білком, отриманим для комерційних цілей з використанням технології рекомбінантної ДНК. Існує два основні підходи для отримання генно-інженерного інсуліну людини.
У першому випадку здійснюють роздільне (різні штами-продуценти) отримання обох ланцюгів з подальшим фолдінг молекули (освіта дисульфідних містків) і поділом ізоформ.
У другому - одержання вигляді попередника (проінсуліна) з подальшим ферментативним розщепленням трипсином і карбоксипептидази В до активної форми гормону. Найбільш кращим в даний час є отримання інсуліну у вигляді попередника, що забезпечує правильність замикання дисульфідних містків (у разі роздільного отримання ланцюгів проводять послідовні цикли денатурації, поділу ізоформ і денатурації).
При обох підходах можливе як індивідуальне отримання вихідних компонентів (А- і В-ланцюга або проінсулін), так і в складі гібридних білків. Крім А- і В-ланцюга або проінсуліна, у складі гібридних білків можуть бути присутніми:
білок носій, що забезпечують транспортування гібридного білка в Периплазма клітини або культурне середовище;
афінний компонент, істотно полегшує виділення гібридного білка.
При цьому обидва ці компоненти можуть одночасно бути присутнім у складі гібридного білка. Крім цього, при створенні гібридних білків може використовуватися принцип мультімерной, (тобто, в гібридному білку присутня кілька копій цільового поліпептиду), що дозволяє істотно підвищити вихід цільового продукту.
У Великобританії за допомогою Escherichia coli (кишкова паличка) синтезовані обидві ланцюга людського інсуліну, які потім були з'єднані в молекулу біологічно активного гормону. Щоб одноклітинний організм міг синтезувати на своїх рибосомах молекули інсуліну, необхідно забезпечити його потрібної програмою, тобто ввести йому ген гормону.
Хімічним способом отримують ген, що програмує біосинтез попередника інсуліну або два гени, що програмують окремо біосинтез ланцюгів А і В інсуліну.
Наступний етап - включення гена попередника інсуліну (або гени ланцюгів порізно) в геном Escherichia coli - особливого штаму кишкової палички, вирощеного в лабораторних умовах. Це завдання виконує генна інженерія.
