5-8 хвилин (Рис.14). Так само для всіх тромболітичні препаратів спостерігається зниження часу затримки коагуляції по відношенню до контрольних значень (без тромболітичні препаратів). br/>В
Рис.14. Залежність часових параметрів фібринолізу від виду тромболітичної препарату (n = 4). br/>
На рис.15 зображена залежність інтенсивності світлорозсіювання згустку від часу і відстані від активатора для різних тромболітичні препаратів (реальна картина з Відеомікроскопи представлена ​​на рис. 16). Видно, що в експериментах з ТПА та стрептокіназою фронт фібринолізу сповільнюється і зупиняється, в експерименті з урокіназою фронт не зупиняється протягом усього експерименту. У всіх експериментах із використанням тромболітичних препаратів у клінічних концентраціях спостерігалася спонтанна активація згортання по всьому об'єму плазми (додаток 2). Швидкість розповсюдження хвилі фібринолізу в перші 10 хвилин для всіх тромболітичні препаратів становить 45-55 мкм/хв (Таблиця 3). br/>
Таблиця 3. Швидкість поширення хвилі фібринолізу [мкм/хв] для різних тромболітичних препаратів - ТПА 20 [мкг/мл], УПА 180 [МО/мл], СК 200 [МО/мл] (n = 4). p> ТПАУПАСКFibrinolysisSpeed, мкм/мін45 + -553 + -647 + -6
В
Рис.15. Типова залежність інтенсивності від часу і відстані від активатора для різних тромболітичних препаратів. br/>В
Рис.16. Відеомікроскопи. Поширення хвиль фібринолізу та коагуляції в перші 20 хвилин експерименту. Хвиля коагуляції стартує від активатора (зверху). Перший ряд - контрольний експеримент (без додавання тромболітичної препарату), другий ряд - додавання стрептокінази (200МЕ/мл), третій ряд - додавання ТПА (20мкг/мл), четвертий ряд - додавання урокінази (180МЕ/мл). Смуга масштабу - 1мм. br/>
Пошук реакції активації згортання ферментами фібринолізу
Для пошуку фактора коагуляції, який активується фібринолізом було вирішено піти знизу каскаду згортання наверх - фактори перевірялися в наступному порядку I, II, X, IX, XI.
Фібриноген і протромбін
Перед експериментом фактор II попередньо змішувався з ppack (D-Фенілаланін-L-пролив-L-аргінін хлорметил кетон) для інактивації активних форм протромбіну. Далі розчин очищався від ppack методом діалізу протягом доби при температурі +4 В° C у фосфатному буфері НФБ. p align="justify"> Для перевірки того, що фактор II В«живийВ» використовувався фактор Xa, який активував протромбін (чинник II), що викликало утворення фібрину (збільшення інтенсивності в серіях 2 і 3, рис 17).
Перевірка активації фібриногену (фактор I) і протромбіну урокіназою здійснювалася експериментом на планшетному фотометрі (рис.17). У лунку заливався фібриноген, протромбін і урокіназа. В якості буфера використовувався 0.5% розчин БСА в HEPES (20mM) і NaCl (140mM). Якби урок...
