p>
. ампліфікація фрагмента ДНК або РНК даного збудника;
. гібридизаційним - флуоресцентна детекция, яка виробляється або безпосередньо в ході ПЛР, або після її завершення.
Екстракція ДНК з клінічного матеріалу проводиться у присутності внутрішнього контрольного зразка, який дозволяє контролювати виконання процедури дослідження для кожного зразка. Потім з отриманими пробами ДНК або РНК проводиться реакція ампліфікації фрагмента нуклеїнової кислоти виявляемого збудника за допомогою специфічних до нього праймерів і ферменту Taq -полімерази. У складі реакційної суміші присутні флуоресцентно - мічені олігонуклеотидні зонди, які гибрідизуючою з комплементарним ділянкою ампліфіціруемого ДНК / РНК - мішені, в результаті чого відбувається наростання інтенсивності флуоресценції. До олігонуклеотидних зондам, специфічним до різних ДНК / РНК - мішенях, прикріплені різні флуоресцентні мітки. Це дозволяє реєструвати накопичення специфічного продукту ампліфікації кожної ДНК / РНК - мішені шляхом вимірювання інтенсивності флуоресцентного сигналу по відповідному каналу. Отримані дані - криві накопичення флуоресцентного сигналу по двох каналах - аналізуються за допомогою програмного забезпечення що приладу для проведення ПЛР в режимі «реального часу». По одному з каналів реєструють накопичення продукту ампліфікації ділянки ДНК / РНК збудника, а по іншому - накопичення продукту ампліфікації ДНК / РНК внутрішнього контрольного зразка.
3. Епідеміологія вірусних гепатитів в м. Новоросійську
Дослідницька робота проводилася в бактеріологічній лабораторії інфекційної лікарні м. Новоросійська. У роботі розглянута і проаналізована частота народження різних маркерів збудників вірусних гепатитів за 2008 - 2012 роки. Обстеженню підлягали особи, що відносяться до різних соціальних груп (пацієнти інфекційних відділень, обстежені за клінічними показаннями, пацієнти протитуберкульозного диспансеру, відділення реанімації, вагітні, ув'язнені, співробітники ЛПУ).
Антигени вірусу гепатиту В спільно з вироблялося на них антитілами представляють комплекс специфічних маркерів гепатиту В , індикація яких має важливе діагностичне, прогностичне, клінічне та епідеміологічне значення.
Таблиця 1 - Частота народження окремих маркерів вірусу гепатиту В серед пацієнтів різних лікувальних установ за 2012 рік
Інфекційне отделеніеГородскіе поліклінікіОтделеніе реанімацііВсего обстежено ліц478115411абс.% абс.% абс.% HBs - Ag 367,5272,3 - анти - HBc - IgM 5210,930,319,0 анти - HBc - IgG 10,2 - 19,0 HBe - Ag 204,2 ---- анти - HBe - IgG 12125,3111,0218,2
Обстеження пацієнтів трьох лікувальних установ показало, що найбільша частота народження всіх маркерів до вірусу гепатиту В серед хворих інфекційного відділення. Досить високий відсоток виявлення антитіл до HBe - Ag дозволяє прогнозувати сприятливий результат захворювання. Визначення даних антитіл у сироватці крові говорить про зниження активності ін...
