ку з цим у подібних випадках випробовувані розчини попередньо звільняються від заважають визначенню лікарських речовин шляхом ультрафільтрації, що дозволяє відокремити низькомолекулярні речовини від високомолекулярних пірогенів.
.3 Важкодоступні і маловикористовувані методи визначення пірогенних речовин у лікарських засобах
До фізичних методів відноситься полярографія. С. Ш. Чаусовським розроблено методику визначення пірогенності води і ряду лікарських препаратів, заснована на здатності пірогенних речовин пригнічувати полярографический максимум кисню. Однак полярографический метод по чутливості виявлення пірогенних речовин на 2 порядки поступається біологічному випробуванню на кроликах.
Л. Е. Щедріної і Л. І. Брутка розроблена методика люмінесцентного аналізу визначення бактеріальних пірогенів в дистильованої воді, заснована на зміні спектральних властивостей двох барвників (родаміну 6Ж і 1-аніліно-нафталін - 8-сульфоната) у присутності пірогенів. Однак зазначена методика не може широко використовуватися, так як вона здійснюється із застосуванням малодоступних і дорогого флуориметра марки СДЛ - 1.
Пірогенообразующіе мікроорганізми, а також бактеріальні ліпополісахариди володіють поглинанням в УФ-області при 259 - 260 нм. У зв'язку з цим розроблена методика виявлення пірогенів в дистильованої воді і 0,9%-ном розчині натрію хлориду, що включає попереднє концентрування пірогенів з наступним визначенням оптичної щільності. Однак і ця методика не знайшла застосування в практиці, так як вимагає використання малодоступних кварцових кювет з товщиною шару 10 см або ж важкодоступній апаратури для концентрування пірогенів методом ультрафільтрації з застосуванням спеціальних мембранних фільтрів.
За кордоном на ряді фармацевтичних підприємств в даний час для визначення пірогенності застосовується мікробіологічний метод, заснований на підрахунку загального числа мікроорганізмів у аналізованому зразку до його стерилізації. Так, вода для ін'єкцій вважається пирогенной, якщо в ній міститься більше 10 мікроорганізмів в 1 мл.
Недоліком цього методу є відсутність диференціації грампозитивних і грамнегативних мікроорганізмів, так як саме останні зумовлюють пірогенність розчинів. У зв'язку з цим безсумнівний практичний інтерес представляє вдосконалений метод виявлення пірогенів, заснований на виборчій ідентифікації грамнегативних мікроорганізмів у присутності 3%-ного розчину гідроксиду калію.
За методикою Л. Є. Щедріної і Л. І. Брутка на предметне скло наносять 1 краплю 3%-ного розчину гідроксиду калію і вносять в неї одну або кілька (до 10) колоній мікроорганізмів, вирощених на мясопептонном агарі. Якщо протягом 1 хв суспензія бактерій стає в'язкою, желеподібної, тягнеться за петлею, то аналізована культура є грамнегативної. Запропонована методика перевірена на великій кількості грампозитивних і грамнегативних мікроорганізмів і рекомендована до впровадження на фармацевтичних заходах.
Висновок
У цій роботі було розглянуто одне з найважливіших вимог до якості ін'єкційних лікарських форм, а саме апірогенна. Апірогенна ін'єкційних розчинів забезпечують точним дотриманням правил отримання та зберігання апірогенної води (Aqua pro injectionibus) і умов виготовлення ін'єкційних розчинів.
У зв'язку з цим в курсовій роботі були детально розглянуті способи депірогенізаціі (хімічні та фізико-хімічні); методи і апарати для отрим...
