ння бактеріологічного дослідження є необхідним у пацієнтів з клінічною симптоматикою. У деяких ситуаціях молекулярно-біологічні методи є більш чутливими, ніж культурадьний метод. Чутливість культурального методу багато в чому визначається якістю живильного середовища і умов транспортування зразка в лабораторію. При дотриманні умов транспортування клінічного матеріалу в лабораторію, використанні якісних поживних середовищ, суворого проведення умов лабораторного дослідження бактеріаюгнческое дослідження є методом вибору, і навпаки. Отже, вибір молекулярно-біологічного або культурального методу залежить від організаційних умов і якості проведення лабораторного дослідження, а також від епідеміологічного ситуації в популяції. У популяції з підвищеним ризиком поширення захворювання бактеріологічне дослідження є методом вибору. У популяції низького ризику, для скринінгу і для дослідження неінвазивних зразків, молекулярно-біологічні методи підходять більше (наприклад, дослідження сечі у чоловіків і вагінальних зразків у жінок). Однак якщо метод використовується для дослідження популяції низького ризику і він не є високо специфічним, можливе отримання великого кількості хибнопозитивних результатів. Молекулярно-біологічні методи є оптимальними для дослідження зразків, отриманих неінвазивним способом, але їх чутливість і специфічність варіабельні. Чутливість молекулярно-біологічних методів вище при дослідженні зразків сечі у чоловіків, в порівнянні з жіночими зразками. Оптимальним для жінок є дослідження вагінальних матеріалів.
При дослідженні пацієнтів без клінічних симптомів захворювання молекулярно-біологічні методи обов'язково повинні підтверджуватися бактеріологічним методом. Поки ще немає ліцензованих молекулярно-біологічних методів для дослідження ректальних або фарінгеального зразків. ДНК/РНК-методи можуть бути використані для видового підтвердження N.gonorrhoeae з культур. Для цієї мети матеріал, зібраний петлею з специфічної колонки, може бути перенесений до пробірку типу Еппендорф або будь-яку іншу пробірку з 100 мкл забуферованого фізіологічного розчину. Однак цей тест не виключає необхідності попередньої ідентифікації N. gonorrhoeae.
Для проведення молекулярно-біологічних методів з клінічного зразка необхідно виділити ДНК у відповідності з інструкцією виробника. Методи призначаються для виявлення N. gonorrhoeae в урогенітальних пробах. У більшості випадків молекулярно-біологічні методи мають високу чутливість і специфічність. Однак наявність субстанцій інгібіторів в деяких зразках, а також той факт, що у деяких штамів N. gonorrhoeae може не бути послідовності, що є мішенню для молекулярно-біологічного методу, може призводити до зниження чутливості методу. Відома недостатня специфічність деяких ДНК/РНК-методів, та отримано велику кількість хибнопозитивних результатів через перехресних реакцій з комменсальнимі видами нейсерій. таких як N. lactamlса, N. cinerea. N subjtava. Високу специфічність показали нові методи ПЛР-аналізу. використовують праймери, спрямовані на роги псевдоген N. gonorrhoeae. Цей ген (PorAJ/псевдо-ген підходить для диференціальної діагностики N. gonorrhoeae і N. meningitides . Для всіх екстрагенітальних зразків або для визначення антібіотікочувствітельності повинно проводитися культивування з подальшою ідентифікацією нейсерій до виду.
A. Проведення аналізу
Виділення ДНК і провели ампліфікації проводиться строго у відповідності з інструкцією виробника діагностичних наборів. Необхідно суворе дотримання інструкцій з прибирання приміщень і обробці поверхонь. Після закінчення роботи робочі поверхні повинні оброблятися ДНК/РНК деградуючими розчинами для видалення раніше ампліфікованих нуклеїнових кислот.
B. Інтерпретація результатів
Розробка і впровадження діагностичних методів, заснованих на ампліфікації нуклеїнових кислот, дозволяють поліпшити діагностику гонореї, так само як і багатьох інших інфекційних хвороб. Однак особливу увагу слід приділяти правильній інтерпретації результатів молекулярно-біологічних тестів, навіть якщо вони мають добрі діагностичні характеристики. Це особливо важливо у випадку застосування цих методів для скринінгу гонореї в популяціях з низькою поширеністю інфекції.
2.3.4 Лабораторні критерії діагнозу гонореї;
• виділення Neisseria gonorrhoeae з клінічного зразка;
• виявлення антигену або нуклеїнової кисло ти N. gonorrhoeae:
• виявлення грамнегативних внутрішньоклітинних диплококів в мазках з уретри чоловіків.
3 Лабораторна діагностика урогенітального хламідіозу
В
Морфологія, стійкість і культуральні властивості хламідій
Хламідії (Chlamydia trachomatis) є дрібними грамнегативними мікроорганізмами. Хламідії складають групу облігатних внутрішньоклітинних паразитів, не можуть розмножуватися поза клітини господаря. Найбільший тропізм хламідії виявляють до кліти...
