тгонную колбу на 500 ... 750 см3. Колбу для спалювання необхідно ретельно сполоснути, перевіряючи повноту змивання шляхом додавання 1 ... 2 крапель розчину метилового червоного. Для перенесення спаленої навішування потрібно 200 ... 250 см3 дистильованої води. Приймачем служить конічна колба на 250 ... 300 см3, в яку попередньо повинна бути налита 25 ... 30 см3 0,1 н. розчину H 2 SO 4 . Кінець трубки холодильника повинен бути занурений в розчин H 2 SO 4 .
У отгонную колбу обережно, по стінках, уникаючи змішування рідин, слід долити 50 ... 70 см3 33%-го розчину NaOH. У колбу кинути шматочок лакмусового паперу і швидко закрити пробкою, з'єднаної краплевловлювачем з холодильником. Обережно перемішуючи вміст колби, відразу ж починати її нагрівання. Реакція рідини в колбі повинна бути різко лужної. Після того як рідина в колбі бурхливо закипить, приймач опустити з таким розрахунком, щоб кінець трубки холодильника знаходився на деякій відстані від поверхні рідини. У такому положенні продовжувати отгонку до тих пір, поки з колби відганяючи НЕ менше 2/3 міститься в ній рідини. Крім того, кінець відгону визначають перевіркою реакції дистиляту по лакмусовим папері. Якщо отгонка закінчена, то крапля дистиляту не повинна викликати посиніння лакмусового паперу. Наприкінці відгону при кипінні маси з'являються характерні поштовхи, що свідчать про припинення відгону. По закінченні відгону кінець трубки холодильника змити водою до приймальні колбу і міститься в приймачі надлишок H 2 SO 4 відтитрувати 0,1 н. розчином їдкого лугу в присутності метилового червоного або подвійного індикатора метилового червоного або метилового синього.
Паралельно в тих же умовах, але без навішування досліджуваної речовини, провести контрольний досвід.
Вміст загального азоту Х (у%) обчислюється за формулою:
x = (V-v 1 ) * k * 0.0014 * 100/m
де v - обсяг 0,1 н. розчину їдкого лугу, що пішов на титрування H 2 SO 4 у контрольному досвіді, см3; v1 - об'єм 0,1 н. розчину їдкою лугу, що пішов на титрування надлишку H 2 SO 4 в робочому досвіді, см3; k - коефіцієнт перерахунку на точно 0,1 н. розчин лугу; 0,0014 - кількість азоту, еквівалентну 1 см3 0,1 н. розчину їдкого лугу; т - маса навішення досліджуваного продукту, м.
Розбіжність між паралельними визначеннями не повинно перевищувати 0,3%.
Кількість білкових речовин визначається шляхом множення азоту на коефіцієнт, що відповідає даному продукту (наприклад, для сировини, що містить білки м'язових та нервової тканин - протаміни, гістони, альбуміни, глобуліни - 6,25; білки опорно-трофічних і епітеліальних тканин - протеіноіди, альбуміноіди, склеропротеіни - 5,71).
полумикрометодом визначення вмісту загального азоту (стандартний метод). Мінералізацію навішування слід проводити так само, як по арбітражному методу. Масу наважки збільшують до 0,5 г, так як надалі проводиться розведення. p> Колориметричний метод визначення вмісту загального азоту (нестандартний метод). Метод заснований на здатності NH-, давати інтенсивне яскраво-жовте забарвлення з реактивом Несслера.
Визначення вмісту білкового і небілкового азоту. Досліджуваний матеріал повинен бути змішаний з водою. До суміші слід додати реактив, осаджуючий білок. Випав осад білка відфільтрувати і визначити вміст азоту в осаді і у фільтраті. Азот осаду відповідає білкового азоту, а азот фільтрату - небілкова. Якщо відомо вміст загального азоту в досліджуваному матеріалі, можна обмежитися визначенням азоту тільки в осаді або в фільтраті і по різниці між загальним азотом в досліджуваному матеріалі і азотом в осаді або в фільтраті обчислити кількість білкового азоту.
Метод визначення вмісту білкового азоту заснований на здатності білкових речовин утворювати з гидратом окису міді Сu (ОН) 2 з'єднання, не розчинні навіть у гарячій воді. Кількість азоту в отриманому осаді визначається арбітражним або іншим стандартним методом.
Для визначення вмісту азоту істинних білків (білковий азот) слід відважити 0,5 ... 1,0 г (з похибкою не більше 0,01 г) тонко розтертого в ступці досліджуваного матеріалу і помістити його в термостійкий хімічний стакан на 100 ... 150 см3. Додати 50 см3 дистильованої води і нагріти до кипіння. До нагрітої масі (суміші) прилить 25 см3 розчину мідного купоросу (60 г CuSO 4 . 5H 2 O розчинити в 1000 см3 дистильованої води) і при постійному помішуванні долити 25 см3 розчину NaOH (12,5 г NaOH розчинити в 1000 см3 дистильованої води). p> Після відстоювання суміші рідину обережно злити декантацією через паперовий фільтр, а осад у склянці промити кілька разів гарячою дистильованою водою, зливаючи промивні води через той же фільтр. Промивання вест...
