овується суміш полярного і неполярного розчинників.
Наважку фаршу масою 5 г (борошна - 2 г), зважену з похибкою не більше 0,001 г, слід помістити в посудину гомогенізатора. Туди ж додати хлороформ, метанол і дистильовану воду. Найбільш повне вилучення ліпідів з тканин риби відбувається при співвідношенні хлороформу, метанолу та води - відповідно -1:2: 0,8, з урахуванням води, міститься в досліджуваному зразку (визначається попередньо).
Співвідношення мас навішення і екстракційної суміші має бути 1: 40. Обробку (перемішування) маси в гомогенизаторе слід проводити протягом 1,5 ... 2 хв при швидкості 5000 об/хв. Отриманий гомогенізат відфільтрувати на воронці Бюхнера.
До фільтрату необхідно додати хлороформ і дистильовану воду в такій кількості, щоб співвідношення хлороформу, метанолу і води в суміші було відповідно 2:2:1,8. Для цього залишок, отриманий на фільтрі після фільтрування гомогенізатора, промити такий же порцією хлороформу, яку брали для екстракції, ділячи її на три частини і попередньо промиваючи цією кількістю посудину гомогенізатора. Весь отриманий фільтрат перенести в ділильну воронку з притертою пробкою і додати необхідну кількість дистильованої воли. Після розшарування суміші на дві фази відокремити нижній хлороформенний шар з розчиненими в ньому ліпідами і визначити його кількість, потім виміряти його концентрацію. Для цього піпеткою відібрати 5 см3 місцелли. помістити в попередньо тарований бюксу, видалити хлороформ (випарівая його на водяній бані або залишаючи місцелла у витяжній шафі при кімнатній температурі) і висушити при температурі 100 ... 105 В° С до постійної маси (близько 30 хв). p> Вміст жиру Х (у%) визначається за формулою:
x = (M 1 -m 2 ) * v * 100/m * v 1
де т 2 - маса бюкси з жиром, г; m 1 - маса порожньої бюкси, г; v - обсяг отриманої місцелли, см3; v 1 - обсяг місцелли, узятий в бюксу для визначення концентрації, см3; т - маса навішення досліджуваного речовини, м.
Розбіжність між паралельними визначеннями не повинно перевищувати 0,3%.
2.3 Методи визначення азоту
Існуючі методи визначення вмісту азоту в сировині, напівфабрикатах і готової продукції можна розділити на дві групи: методи, що передбачають спалювання (мінералізацію) навішування досліджуваного продукту; методи, які не передбачають спалювання навішування.
В аналізах, що проводяться в лабораторіях берегових рибообробних підприємств і суден, найбільш часто використовуються методи, що відносяться до першої групи. Деякі з них досить швидкі. Зниження витрат часу на аналіз досягається за рахунок раціонального підбору кількісного та видового складу основних реагентів і каталізаторів, а також суміщення окремих операцій (наприклад, мінералізації, відгону і уловлювання аміаку) і зміни техніки їх проведення (наприклад, заміна титрування спектрофотометрическим аналізом).
В основі методів, які не передбачають мінералізацію навішування, лежать кольорові реакції, які протікають в результаті взаємодії білків з деякими хімічними реактивами.
Визначення вмісту загального азоту (Арбітражний метод ). За цим методом загальний азот повинен бути визначений у вигляді аміаку (NНз) після руйнування азотовмісного речовини (продукту) гарячої концентрованої H 2 SO 4 . Утворився при розкладанні сульфат амонію [(NH 4 ) 2 SO 4 ] слід зруйнувати концентрованої лугом, і отриманий NH 3 відігнати з парою в титрований 0,1 н. розчин H 2 SO 4 . Визначення закінчити звичайним ацідометріческім титруванням.
Наважку досліджуваного продукту (борошно в кількості 0,2 ... 0,5 г, фарш - 0,5 ... 1,0 г), відважені з похибкою не більше 0,0001 г, слід помістити в трубочку з фільтрувального паперу або станіоля, закриту з одного боку. Діаметр її повинен бути трохи менше діаметра горла колби, в якій буде проводитися мокре спалювання. Близько 5 г тузлука (у залежно від вмісту в ньому азоту) обережно влити в колбу на 100 см3, що не торкаючись стінок горла останньої. Потім до навішування додати кілька дрібних кристалів мідного купоросу (0,2 ... 0,3 г) і долити 10 см3 H 2 SO 4 , щільністю 1,84 г/см 3 . Колбу з вмістом обережно нагріти в витяжній шафі, не допускаючи розбризкування рідини.
Коли вміст колби зробиться однорідним, нагрівання припинити, дати охолонути масі, додати 0,5 г сірчанокислого калію і знову нагрівати до тих пір, поки рідина в колбі не стане прозорою, зеленувато-блакитного кольору без бурого відтінку. Внутрішні стінки колби повинні бути абсолютно чистими. Це досягається обережним збовтуванням вмісту колби до змивання зі стінок темних обвуглених частинок борошна.
По закінченні спалювання вміст колби охолодити і перенести в о...
