н. Відбір проб проводився через кожні 2 години, шляхом сенсу клітин з поверхні середовища 4 мл води і визначалася оптична щільність суспензії на ФЕК при?=590 нм.
Паралельно досліджувався цикл розвитку мікроорганізму, для цього готувалися препарати живих і фіксованих клітин.
Прижиттєве дослідження мікроорганізму вироблялося з метою вивчення його морфології і рухливості. Для цього використовувався: препарат «роздавлена ??крапля». На предметне скло наносимо краплю води, в неї поміщаємо досліджувані мікроорганізми, перемішуємо і покриваємо покривним склом, микроскопируют, як правило, сухий системою.
Препарат фіксованих забарвлених клітин служив для виявлення морфологічних змін в циклі розвитку Az. chroococcum, а також слизу і капсул, що утворюються при старінні клітин азотобактера.
Культивування клітин азотобактера проводили в рідкому середовищі Берка, для дослідження наростання біомаси клітин і синтезу ИУК. В якості посівного матеріалу використовувалася дводобових культура азотобактера, вирощена попередньо на щільному середовищі Ешбі. Клітини змивали середовищем Берка. Культивування проводили при 26? С на гойдалці 110 об / хв. Проби відбирали кожні 2 години. Визначали оптичну щільності (ОП) бактеріальної суспензії на ФЕК при?=590 нм. Значення ОП переводили потім в число клітин в 1 мл., Далі будували криву. Паралельно визначали кількість накопиченої ИУК.
2.6 Визначення чутливості виділених штамів до різних антибіотиків
Бактеріальну суспензію об'ємом 5 мкл приготовлену за стандартом мутності 10 од. висівають на чашку Петрі «суцільним газоном». Проводиться поділом чашки на сектори. В окремі сектора розміщуються дискові системи з антибіотиками.
3. Результати та їх обговорення
Першим етапом роботи було виділення штамів азотобактера із зразків різних типів грунтів.
Результати представлені в таблиці 1 і 4. Виявлено наявність типових колоній штамів азотобактера в 6 зразках грунтів - чорнозему опідзоленого (Арзамаський район), сірої лісової (Дальне-Костянтинівський район), темно-сірої лісової (Арзамаський район ), вилужені чорнозему (Дальне-Костянтинівський район) та сільноокультуренной подзолистой (Уренскій район).
З 11 проб (Вадского, ДЗЕРЖИНІВСЬКЕ, Дальне-Костянтинівський, Сосновський райони) азотобактер НЕ висівався.
На наступному етапі вивчалися культуральні ознаки-морфологічні особливості колоній і клітин, фізіолого-біохімічні ознаки виділених штамів з метою підтвердження належності їх до роду Azotobacter і певним видам. Результати наведені в таблиці 3 і 4. Встановлено, що виділені штами бактерій з різних зразків грунтів за ключовими морфологічним і фізіолого-біохімічними ознаками ставилися до роду Azotobacter і виду Azotobacter chroococcum (таб.2).
Таблиця 3. Ознаки виділених штамів Azotobacter
пробаподвижностьпигментИспользование углеводовцистыкапсулыкрахмалманит№1+Темно-коричневый++++№3+Темно-коричневый++++№4+Темно-коричневый++++№7+Темно-коричневый++++№10+Темно-коричневый++++№17+Темно-коричневый++++
Таблиці 4. Морфологічні особливості колоній Azotobacter
Проба грунту ...
