и проведенні декількох пасажів). Тому до теперішнього часу культуральний метод діагностики урогенітального хламідіозу не отримав широкого розповсюдження в практичній лабораторній діагностиці і використовується в основному для наукових цілей, а також для порівняльної оцінки специфічності і чутливості інших методів діагностики хламідіозу.
Цитологічний метод
Цитологічний метод лабораторної діагностики найбільш простий і доступний. Даний метод дає загальне уявлення про цитологічної картині, морфології клітин з вогнища поразки, наявності мікробного обсіменіння, міцелію грибкової флори і найпростіших. Специфічні морфологічні ознаки дозволяють визначити наявність хламідій в препараті.
Препарат фіксують метиловим спиртом (5 хв), або 96% етиловим спиртом (5 хв), або сумішшю Нікіфорова (1 частина етилового спирту і 2 частини етилового спирту - 5 хв), або охолодженим безводним ацетоном (3 - 5 хв).
Після фіксації висушені мазки забарвлюють за Романовським-Гімзою або по Маккіавелі.
Забарвлення за Романовським-Гімзою: фарбу Романовського-Гімза розводять у співвідношенні 1:10 фосфатним буфером з рН 7.2 - 7.6 (1 частина фарби і 9 частин фосфатного буфера) і наносять на мазок на 1 - 2 години, далі препарат промивають під проточною водою, прополіскують дистильованою водою, диференціюють, занурюючи на 1 - 3 секунди в 96% етиловий спирт, висушують і мікроскопують з використанням імерсійною системи при загальному збільшенні мікроскопа в 900 - 1500 разів (бл. 10-15, об. 90-100). p> При мікроскопії ЕТ хламідій являють собою дрібні (0.15 - 0.3 мкм) освіти округлої форми, пофарбовані в рожевий або червонуватий колір. Вони можуть знаходитися як позаклітинно (переважно), так і внутрішньоклітинно. Більші РТ (0.5 - 1.5 мкм) фарбуються в різні відтінки від блакитного до темно-синього кольору і знаходяться внутрішньоклітинно, при мікроскопічному дослідженні вони виявляються у вигляді скупчень навколо ядра епітеліальної клітини у формі "шапочки жандарма" або дифузно.
Ядра клітин при даній забарвлення мають вишневий відтінок різної інтенсивності, а цитоплазма фарбується в ніжно-блакитний колір.
Забарвлення по Маккіавеллі: мазок-відбиток на предметному склі фіксують над полум'ям пальники кілька секунд і далі фарбують 0.25% розчином основного фуксину в протягом 5 хвилин. Потім фарбу змивають під проточною водою. Препарат поміщають на кілька секунд у 0.5% розчин лимонної кислоти і потім промивають під проточною водою. Останній етап - додаткове фарбування 1% розчином метиленового синього протягом 20 - 30 сек, препарат промивають водою, висушують і мікроскопіруют з використанням імерсійною системи при загальному збільшенні мікроскопа в 900 - 1500 разів.
Ядра клітин забарвлюються в блідо-рожевий колір, цитоплазма - в ніжно-блакитний. РТ (Внутрішньоклітинні) фарбуються в різні відтінки блакитного кольору (від світлого до темного), ЕТ мають червонуватий колір і можуть знаходитися як внутрішньоклітинно, так і позаклітинно (переважно).
Цитологічні методи прості у виконанні, дешеві, не вимагають складного обладнання, великих тимчасових витрат, спеціальної підготовки і додаткових навичок у лаборантів і лікарів-лаборантів, володіють технікою світлової мікроскопії. Проте їх діагностична значимість дуже низька: у хворих чоловіків діагностувати хламідійну інфекцію цитологічним методом в зіскрібків з уретри вдається лише в 10 - 15% випадків, а у жінок - до 30 - 40% випадків (в зіскрібків з цервікального каналу).
У теж час цитологічний метод дозволяє виявити неспецифічні морфологічні зміни епітеліальних клітин, які можуть побічно свідчити про наявність ураження урогенітального тракту, в тому числі і хламідійної етіології. Нормальні епітеліальні клітини мають круглий ядро діаметром 10 - 15 мкм, цитоплазма при забарвленні за Романовським-Гімзою профарбовується в блакитний колір, хроматин - в пурпуровий. Сама клітина - округлої форми, діаметр її досягає 20 - 25 мкм. У соскобах у хворих з хламідійною урогенітальною інфекцією можуть бути наступні морфологічні зміни епітеліальних клітин: клітини збільшені в розмірі, діаметром до 30 мкм і більше, цитоплазма їх нерідко вакуолізірована, може мати включення різного розміру - Від 0.3 до 0.5 мкм і більше. Іноді можна спостерігати клітини з явищами фагоцитозу. У клітинах відбувається зміна морфології ядра: відзначається поліморфізм, макронуклеоз - збільшення ядра до 15 мкм і більше, полінуклеоз (2 і більш ядер в клітині). У соскобах також можуть зустрічатися лімфоцити, поліморфноядерні лейкоцити, плазмоцити і мононуклеарние клітини. Виразність морфологічних змін часто корелює з виразністю патологічного процесу.
Описані клітинні зміни можуть служити непрямою ознакою хламідійної інфекції. Цитологічний метод придатний для проведення масових та первинних обстежень урологічних та гінекологічних хворих з подальшим обстеженням їх більш специфічними і діагностично значущими методами при отриманні патологіч...
