розподільчої хроматографії з нанесеними фазами цілком виправдано.
Нерухому фазу і розчинник зазвичай підбирають таким чином, щоб вони були практично взаємно нерозчинні. Це зрозуміло, тому що в противному випадку нанесена фаза буде швидко вимиватися з колонки розчинником. Такими комбінаціями фази і розчинника є, наприклад, трис (ціанетоксі) пропан і гексан, парафиновое масло і вода. Однак при роботі з такими системами компоненти зразка, як правило, володіють коефіцієнтами розподілу близькими або до нуля, або до нескінченності, тобто або елюіруются з фронтом розчинника без поділу, або затримуються в колонці нескінченно довго. Методи нанесення нерухомої фази можуть бути різними. Фаза може бути розчинена у відповідному розчиннику з низькою температурою кипіння і нанесена методом випаровування, як це роблять у ГЖХ. Фаза може бути нанесена безпосередньо у вигляді рідини або пари. В обох випадках заповнення колонок представляє труднощі, якщо частки сорбенту менше 40 мкм і не можуть бути використані для заповнення В«сухимВ» способом.
Більше популярним є динамічний метод нанесення нерухомої фази. Він полягає в тому, що носій, наприклад силікагель з розміром частинок від 5 до 10 мкм, вносять в колонку звичайним суспензійним способом. На колонку подають заданий об'єм розчину нерухомої фази, потім прокачують розчинник, насичений нерухомою фазою, до встановлення рівноваги. Носій у колонці рівномірно покривається нерухомою фазою, вона знаходиться в рівновазі з насиченим фазою розчинником. Така система буде стабільною і не потребує відновленні через унесення фази. Насичення розчинника фазою може проводитися в предколонке з тією ж фазою, яка встановлюється після насоса до інжeктоpa і періодично замінної. Недоліки розподільної хроматографії з нанесеними фазами наступні. Неможливо використовувати градієнтну ВЕРХ через виносу фази. Неможливо працювати в препаративних режимі, так як зібрані фракції, природно, будуть містити помітну кількість нанесеної фази, що залишається в зразку після упарювання розчинника. Важко змінювати склад розчинника, так як при цьому колонка тривало приходить в новий рівноважний стан з новим розчинником. Ускладнено використання підвищених температур для аналізу, оскільки розчинність нерухомої фази при підвищенні температури помітно зростає. Розчинник, в який вводиться проба, повинен за складом бути максимально близьким до рухомій фазі, інакше можливі частковий змив веподвіжной фази, помилкові піки і порушення процесу хроматографії. Кілька слів про носія і його бажаних характеристиках для розподільної хроматографії з нанесеними фазами. Він повинен мати досить великий обсяг пір, бути при цьому міцним механічно (Допускати суспензійне заповнення колонки), мати великі пори і не дуже більшу поверхню. Наносимая фаза не повинна бути високов'язкої, щоб не було утрудненого масообміну і зниження ефективності поділу з цієї причини.
Література:
1. Енгельгардт X. Рідинна хроматограф...
