ивних речовин із середовища. Недолік всіх описаних методів полягає в тому, що багато бактерії можуть бути високочутливими до деяких компонентам агару. Посів для підрахунку колоній можна об'єднати з фізіологічними тестами, використовуючи індикаторний агар.
3.7.Метод визначення найбільш вірогідного числа бактерій (метод граничних розведень).
Цей спосіб дозволяє провести грубий підрахунок числа життєздатних клітин. Він полягає в тому, що готують кілька послідовних розведень культури в ростової середовищі і після інкубації підраховують число пробірок, в яких відсутній ріст. Передбачається, що в ці пробірки при посіві не було внесено жодної життєздатної клітки. Приймаючи, що розподіл клітин описується формулою Пуассона, середнє число клітин т в даному розведенні обчислюють за формулою
т =-1пр 0 , (6.11)
де ро - Відношення кількості пробірок, в яких відсутній ріст, до загального числу пробірок в даному розведенні. Потім середнє значення множать на фактор розбавлення і коректують з урахуванням обсягу інокуляту, щоб обчислити число життєздатних клітин у вихідній культурі. Цей метод більш трудомісткий по порівняно з методами прямого підрахунку, але його доводиться використовувати, якщо мікроорганізм не росте на щільних середовищах. Крім того, він дозволяє врахувати організми, що ростуть повільніше інших, якщо вони знаходяться в одній пробі з швидкорослими формами. Найбільш важлива перевага цього методу полягає в тому, що в тих зразках, де, крім досліджуваних, присутні інші організми, він дозволяє виявити об'єкт, що цікавить, наприклад за допомогою мікроскопії або за утворення характерних продуктів (наприклад, сірководню бактеріями сульфатредуктори; в присутності Н2S і Fе (П) утворюється чорний осад FеS). Крім того, можна виключити контамінірующіе бактерії, застосовуючи селективні середовища. br/>
Прямий підрахунок.
Кількість мікробних клітин можна підраховувати безпосередньо під мікроскопом за допомогою лічильної камери, що представляє собою спеціальне предметне скло з невеликою виїмкою відомої глибини (Зазвичай 0,02 мм) і нанесеною сіткою з невеликих квадратів відомої площі. Виїмку заповнюють досліджуваної суспензією бактерій, і щільно закривають камеру притертими міцним покривним склом, після чого підраховують кількість бактерій в цьому певному обсязі суспензії. Для прямого підрахунку під мікроскопом можна використовувати також мембранні фільтри, фарбуючи обложені на них бактерії. При цьому на висушені фільтри наносять іммерсійне масло, завдяки чому вони стають прозорими. Цей метод корисний для тих випадків, корду зразок містить менше 10 6 клітин/мл. Іншим способом концентрування проб може бути центрифугування. Для підрахунку бактеріальних клітин вельми зручний електронний лічильник частинок (лічильник Коултера), що дозволяє визначати, крім числа клітин розподіл їх за розмірами.
У природних умовах вимірювати зріст бактерій...
