вані результати може, однак, впливати зміна в стані клітин при інкубації в нових умовах і, крім того, при використанні цього методу можуть виявитися неврахованими покояться форми бактерій. Як правило, перед посівом готують серійні розведення культури, наприклад у фізіологічному розчині, що містить фосфатний буфер. Якщо культура густа, роблять кілька 10 - або 100-кратних розведень, оскільки
кількість життєздатних клітин в пробі заздалегідь не відомо. Навпаки, розбавлені проби, наприклад з природних водойм, що містять незначну кількість бактерій, концентрують фільтруванням або іноді центрифугуванням. Посів роблять
поверхневим або глибинним способом. При поверхневому посіві інокулят у вигляді суспензії клітин об'ємом 0,1 мл наносять на поверхню застиглої агарового середовища. При глибинному посіві вносять 0,1-1,0 мл інокуляту в ще не застиглу середу, після чого її перемішують і розливають по чашках Петрі (передбачається, що короткочасне перебування клітин в розплавленої агарової середовищі, при 45 В° С не впливає на їх життєздатність, але це необхідно перевіряти). Анаеробні бактерії, для підрахунку клітин вирощують в обертових пробірках: пробірки з невеликим кількістю розплавленої агаризованому середовища, закриті пробками, обертають у горизонтальному положенні на холоду, в результаті чого агар застигає у вигляді тонкої плівки на стінках пробірки. Інший спосіб обліку анаеробних бактерій-це
посів у двошаровий агар; бактерії висівають на агаризованому середу в чашках Петрі і поверх неї наносять тонкий шар напіврідкого агару. Розвиток невеликих, компактних колоній відбувається під його поверхнею. Для анаеробів використовують також
посів в тонкий шар агару: інокулят вносять у невелике кількість розплавленого і остудженого напіврідкого агару (0,75%), який виливають потім в чашку Петрі з щільним середовищем. Підрахунок колоній виробляють звичайно в тих чашках (або обертаються пробірках), в яких міститься від 30 до 300 колоній. Для достовірності результатів необхідно підрахувати кілька сотень колоній. При статистичній обробці даних визначають стандартне відхилення як квадратний корінь числа підрахованих колоній. Кожен з цих методів припускає контроль
ефективності посіву за допомогою прямого підрахунку числа клітин (див. нижче); ця ефективність повинна бути близька до 100%. Крім того, слід перевіряти, що клітини в інокуляти не утворюють скупчень. Результати кількісного обліку клітин
звичайно виражають у колонієутворюючих одиницях.
Для визначення чисельності бактерій в сильно розбавлених пробах (наприклад, питній воді) рекомендується використовувати метод підрахунку колоній на мембранних фільтрах. Проби фільтрують через мембранні фільтри з необхідними розмірами пор, після чого фільтр поміщають на агаризованому середу або просто на фільтрувальний папір, просочену живильним середовищем. Колонії утворюються на поверхні фільтра завдяки проникненню через нього пож...
