офосфорна 11,5 моль/л
Склад реакційної суміші:
Ванілін 9,4 ммоль/л
Кислота ортофосфорна 10,8 ммоль/л
Кислота сірчана 1,1 моль/л
Співвідношення сироватка/реакційна суміш 1/1230
Референтні величини:
(НТБ) С - Загальні ліпіди, (г/л) 4-8
Наведений діапазон референтних значень є орієнтовним.
Відтворюваність:
Близько В± 5%
Допоміжний розчин (не входить до складу набору)
Кислота сірчана конц., ч. д. а.
Проведення аналізу:
Довжина хвилі (510-550) нм
Кювета 1 см
Температура (+15 до +25) В° С
У трьох пробірках змішують сірчану кислоту конц., ч. д. а. у співвідношенні 75 +1 з сироваткою (проба), реактивом 1 (стандарт) або дистильованою водою (контрольний розчин), перемещівают і нагрівають 15 хв на киплячій водяній бані (напр.1, 5 мл сірчаної кислоти конц. ч. д. а. і 0,02 мл сироватки, реактив 1 або дистильованої води). Після охолодження пробірок проточною водою змішують гідролізат з реактивом 2 в об'ємному співвідношенні 1 +15 і залишають стояти 50 хв при температурі (з +15 до +25) В° С (напр.0, 1 мл гідролізату проби, стандарту або контрольного розчину і 1, 5 мл реактиву 2). Не пізніше ніж через 60 хв вимірюють оптичну щільність проби (А1) і стандарту (А2) проти контрольного розчину. br/>
Відміряти (мл) ПробаСтандартКонтрольний растворСиворотка Реактив 1 Кислота сірчана конц. 0,02 1,50 - 0,02 1,50 - 1,50 Перемішують і нагрівають 15 хв на киплячій водяній бані. Після охолодження пробірок проточною водою отмеряютГідролізат Реактив 20,10 1,500,10 1,500,10 1,50 Перемішують і залишають стояти 50 хв при (+15 до +25) В° С. Не пізніше ніж через 60 хв вимірюють оптичну щільність проби (А1) і стандарту (А2) проти контрольного розчину
Розрахунок:
Загальні ліпіди (г/л) = 8 Г— А1/А2
2.2.2 Методика визначення вмісту загального холестерину в сироватці крові (Fishbach, Dunning, 2004)
Набір реагентів для визначення концентрації загального холестерину в сироватці та плазмі крові ензиматичним колориметричним методом.
Принцип методу:
Холестерин зі складу ефірів вивільняється під дією ферменту холестерінестераза (ХЕ). За участю ферменту холестеріноксідази (ХО) холестерин окислюється до 4-холеста-3-вона. Вивільнювана перекис водню, за участю ферменту пероксидази, сприяє окислювальному азосочетания 4 - аміноантипірину (4-ААП) і фенолу з утворенням забарвленого з'єднання (хіноніміновий барвник)....
