Інтенсивність забарвлення реакційного середовища пропорційна вмісту холестерину в досліджуваному матеріалі і визначається фотометричним при довжині хвилі 500 (490-520) нм. p align="justify"> Схема реакції:
Ефіри холестерину + Н2О холестерин + жирні кислоти
Холестерин + О2 4-холеста-3-он + Н2О2
Н2О2 + 4-ААП + фенол хіноніміновий барвник + 4 Н2О
Досліджуваний матеріал:
Сироватка, гепаринизированной або ЕДТА-плазма крові без слідів гемолізу.
Проба стабільна 7 днів при температурі 2-8? С.
Склад набору:
Монореагент (250 мл)
Калібратор - розчин холестерину 5,17 ммоль/л (1,5 мл)
Підготовка реагентів до процедури аналізу та їх стабільність:
Монореагент готовий до застосування; після розкриття флакона монореагент стабільний не менше 6 місяців при температурі 2-8? С в захищеному від світла місці. Ретельно закривати флакон з монореагентом після кожного використання. Блідо-рожеве забарвлення монореагента з величиною оптичної щільності до 0, 200 А, виміряної проти дистильованою водою при довжині хвилі 500 нм, не впливає на правильність визначення холестерину в досліджуваному зразку. p> Калібратор готовий до застосування; після розкриття флакона калібратор стабільний не менше 6 місяців при температурі 2-8? С.
нерозітнутих реагенти стабільні протягом року при температурі 2-8? С, монореагент в захищеному від світла місці.
Процедура аналізу:
Компоненти реакційної смесіОпитная пробаКалібровочная пробаКонтрольная пробаМонореагент, мл2, 02,02,0 Сироватка (плазма), мл0 ,02 - Калібратор, мл-0 ,02-Вода дистилят., мл - 0, 02
Реакційну суміш ретельно перемішайте та інкубують не менше 15 хвилин при кімнатній температурі (18-25 В° С) або 10 хвилин при температурі 37? С. Після закінчення інкубації виміряйте оптичну щільність дослідної і калібрувальної проб проти контрольної (холостий) проби при довжині хвилі 500 нм (490-540 нм). Забарвлення розчинів стабільна протягом 1 години після закінчення інкубації при зберіганні проб у захищеному від світла місці при кімнатній температурі. Обсяги досліджуваного зразка і монореагента можна змінити, дотримуючись співвідношення 1: 100. br/>
Автоматичні аналізатори:
Довжина хвилі 500 нм
Вимірювання проти Контрольної проби
Метод вимірювання Кінцева точка
Зміна оптичної щільності Вік
Температура 37? З
Співвідношення зразок/реагент 1: 100
Час преінкубаціі 3 секунди
Час реакції
