ідному інституті туберкульозу (ЦНІІТ) були селекціоновано клоновані штами, чутливі і стійкі до різних концентрацій стрептоміцину, канаміцину, флоримицина (виомицин) і капреоміцину [8]. Досліди in vitro проводили на рідкому середовищі Школьникової методом серійних розведень. Була встановлена ??невисока бактеріостатична активність капреоміцину по відношенню до вихідного чутливих штамів мікобактерій H37Rv. Мінімальна переважна концентрація (МПК) капреоміцину становила 2 мкг/мл. Вона не підвищувалася при дії капреоміцину на штами, що володіють різним ступенем стійкості до стрептоміцину. МПК стрептоміцину при дії на штами, стійкі до різних концентрацій капреоміцину, у порівнянні з дією його на чутливий штам майже не збільшувалася і становила 0,5 мкг/мл. Таким чином, не було виявлено зниження активності стрептоміцину по відношенню до капреоміціноустойчівим штаммам та активності капреоміцину по відношенню до стрептоміціноустойчівим штамів. При дії капреоміцину на штами, стійкі до 250 мкг/мл канаміцину, спостерігалося зниження бактеріостатичній активності капреоміцину в порівнянні з дією його на чутливі штами в 8-16 разів. МПК капреоміцину при дії його на штами, стійкі до 500 і 1000 мкг/мл канаміцину, ще більше збільшувалася і становила 120 мкг/мл. При дії канаміцину на капреоміціноустойчівие штами спостерігалося чітке зниження його активності в порівнянні з дією на чутливі штами. При невисокою: стійкості штамів до капреомініну МПК канаміцину підвищувалася в 5-10 разів, при дії ж канаміцину на високостійкі до капреоміцину штами його активність знижувалася більш ніж в 100 разів. В цілому спостерігалося незначне зниження активності капреоміцину по відношенню до високоустойчіви до канаміцину штаммам і різке зниження активності канаміцину по відношенню до штамів, високостійкі до капреоміцину. При розгляді взаємовідносин між капреоміцином і флоримицину спостерігалися двостороннє зниження чутливості для штамів, що володіють невисокою стійкістю до антибіотиків, і двостороння перехресна стійкість для штамів, що володіють високою стійкістю до даних антибіотиків.
При дії капреоміцину на експериментальну туберкульозну інфекцію у мишей, викликану клонованою і чутливим штамом RV, виявилася низька ефективність капреоміцину в порівнянні з іншими препаратами цієї групи (індекс ефективності дорівнював 5%).
Суть випробування полягає у вимірюванні температури тіла кроликів після введення їм у вушну вену випробовуваних стерильних рідин. Випробування проводять на трьох кроликах, маса тіла яких не відрізняється більше ніж на 0,5 кг. Рідина вважають непірогенной, якщо сума підвищення температури у трьох кроликів не перевищує 1,4 ° С. Якщо ця сума знаходиться в межах 1,5-2,2 ° С, випробування повторюють на п'яти кроликах, а якщо перевищує 2,2 ° С, то рідина вважається піро генної.
Випробування пірогенності на кроликах відрізняється певними труднощами. Тому в багато фармакопеї світу (США, Великобританії, Китаю та ін.) Для визначення пірогенності ЛЗ включений так званий Л АЛ-тест (визначення бактеріальних ендотоксинів). У його основі лежить здатність лізата амебоцитів (клітин крові) мечехвоста специфічно реагувати з ендотоксинами грамнегативних бактерій (ліпосахарідов). У результаті взаємодії ендотоксину і лізата з'являється помутніння прозорою реакційної суміші або відбувається утворення твердого гелю, що служить підтвердженням присутності ендотоксину. Сировиною для виробництва ЛАЛ-реагенту служить кров мечехвостов - морських тварин, що мешкають біля берегів Північної Америки, Японії, Китаю, В'єтнаму.
Л АЛ-гест високоспеціфічен по відношенню до ендотоксинами грамнегативних бактерій. Його чутливість у багато разів вище, ніж у фармакопейного тесту на кроликах, а області застосування значно ширше. ЛАЛ-тест застосуємо у виробничому (Постадійний) контролі вмісту ендотоксинів в ін'єкційних ЛФ, оскільки дає можливість отримання результатів протягом 1-2 годин і одночасного випробування великої кількості зразків. Крім того, цей тест забезпечує надійність і відтворюваність отримання результатів, що поєднуються з простотою використовуваної методики. Реактив для ЛАЛ-тесту уявляє собою сублімаційними висушений лизат, який готовий до використання після розведення його апірогенної водою. Враховуючи переваги ЛАЛ-тесту, підготовлений проект ОФС Визначення вмісту бактеріальних ендотоксинів для включення в чергове видання ГФ РФ.
Випробування на токсичність проводять на білих мишах обох статей масою 19-21 р Випробуваний розчин вводять в хвостову вену п'яти мишам і ведут1 спостереження за ними протягом 48 годину. Якщо жодна з піддослідних мишей протягом цього строку не загине, то ЛП вважається витримали випробування на токсичність. У разі загибелі хоча б однієї миші випробування повторюють за певною схемою і роблять остаточний висновок про його токсичності.
Випробуванням на мік...
