лі)
Хлорамфенікол малорастворим у воді, ефірі, хлороформі, розчинний у етилацетаті. На відміну від хлорамфеніколу і його ефіру стеарату, хлорамфеніколу натрію сукцинат дуже легко розчинний у воді. У етанолі хлорамфенікол легко розчинний, стеарат важко розчинний, натрію сукцинат - розчинний. Хлорамфеніколу натрію сукцинат практично не розчиняється в ефірі і хлороформі, а хлорамфеніколу стеарат легко розчинний у хлороформі. У всіх зазначених розчинниках хлорамфеніколу стеарат утворює мутні розчини. Хлорамфеніколу натрію сукцинат, будучи натрієвої сіллю, дає позитивну реакцію на іон натрію.
Справжність хлорамфеніколу підтверджують по УФ-спектром 0,002%-ного водного розчину, який в області 220-400 нм має максимум поглинання при 278 нм і мінімум при 237 нм. ФС рекомендує встановлювати величину питомого показника поглинання при довжині хвилі 278 нм (від 290 до 305). Водний 0,04%-ний розчин хлорамфеніколу натрію сукцинату в області 230-350 нм має один максимум поглинання при довжині хвилі 276 нм. Для ідентифікації хлорамфеніколу і хлорамфеніколу натрію сукцинату використані другі похідні УФ-спектрів поглинання, а також значення відносин оптичної щільності в максимумах і мінімумах поглинання (Розчинники вода, етанол). p> Реакція гідролізу в лужному середовищі лежить в основі випробування автентичності хлорамфеніколу і його похідних. При нагріванні протягом 1-2 хв з 15%-ним розчином гідроксиду натрію хлорамфенікол і хлорамфеніколу стеарат набувають жовте фарбування, що переходить і червоно-оранжеве. На відміну від хлорамфеніколу стеарата хлорамфенікол при подальшому нагріванні в лужному середовищі утворює цегляно-червоний осад аци-форми n-нітрофенілпропандіола-1, 3. Одночасно відчувається запах аміаку. Фільтрат після підкислення азотної кислотою дає характерну реакцію на хлориди. Це дозволяє підтвердити наявність в молекулі хлорамфеніколу нітрофенільного радикала, аміногрупи і ковалентно пов'язаного атома хлору, оскільки при лужному гідролізі утворюється "підстава" хлорамфеніколу, що переходить у аци-форму, виділяються аміак і натрієва сіль гліоксилової кислоти:
В
Хлорамфенікол, подібно ефедрину, за рахунок наявності в молекулі спиртового гідроксиду та вторинної алифатической аміногрупи може утворювати забарвлені комплексні сполуки з солями важких металів. З розчином сульфату міді утворюється синій осад, який розчиняється у н -бутанолі, фарбуючи його шар у фіолетовий колір.
хлорамфенікол натрію сукцинат ідентифікують також по залишку янтарної кислоти, зокрема при нагріванні з резорцином і концентрованої сірчаної кислотою. Утворюється жовтий розчин, що має в УФ-світлі жовтувато-зелену флуоресценцію. Сіли замість резорцину взяти гідрохінон, після охолодження розбавити водою і змішати з бензолом, то його шар набуває червоне забарвлення.
хлорамфенікол стеарат, будучи складним ефіром, гідролізується в присутності концентрованої хлороводневої кислоти (при нагріванні) з утворенням стеаринової кислоти, яка спливає на поверхню у вигляді масляних крапель, затвердевающих при охолодженні:
В
Відомі численні способи ідентифікації та кількісного визначення, засновані на попередньому гідруванні (цинкової пилом у кислому середовищі) нітрогрупи і молекулі хлорамфеніколу до аміногрупи. Одночасно отщепляются атоми хлору:
В
Утворився 1-n-аминофенил-2-ацетіламінопропандіол-1, 3 диазотируют і перетворюють на азобарвник, поєднуючи з ОІ-нафтолом, О±-нафтиламином або іншим аміном або фенолом. Наприклад, в результаті азосочетания з ОІ-нафтолом утворюється азобарвник червоного кольору:
В
Для ідентифікації лікарських речовин, що містять в молекулі нітрогрупу, використовують також випробування, засноване на послідовному гідруванні (цинком в хлороводневої кислоті) до ароматичного аміну з подальшою його конденсацією з n-диметиламінобензальдегідом до утворення пофарбованої солі основи Шиффа. Хлорамфенікол в цих умовах набуває яскраво-оранжеве забарвлення.
Наявність вихідних і проміжних продуктів синтезу в хлорамфенікол встановлюють методом ТШХ на пластинках Силуфол УФ-254 в системі хлороформ-метанол-вода (90:10:1). На хроматограмі допускається наявність не більше трьох сторонніх плям, кожне з яких не повинно перевищувати пляма свідка за величиною і інтенсивності (не більше 0,5% кожної домішки).
У хлорамфеніколу натрію сукцинат визначають зміст домішки вільного хлорамфеніколу (не більше 5%) методом дифузії в агар (ГФ XI, в. 2. с. 210), встановлюючи антимікробну активність. У хлорамфеніколу стеарат кількісно визначають домішка вільної стеаринової кислоти (не більше 3%) методом нейтралізації за фенолфталеїном.
Кількісне визначення хлорамфеніколу по ФС виконують нітрітометріческім методом після попереднього гідрування в кислому середовищі цинкової пилом:
В В
Зміст хлорамфеніколу визначають і зворотним бромід-броматометріческім методо...
