истеми, враховують специфіку даних мікроорганізмів. Одним з таких мікроорганізмів є грампозитивні бактерії Bacillus subtilis . p> За вивченості генетичного апарату клітини Bacillus subtilis знаходяться на другому місці після E. coli . Для них характерний нечасто зустрічається серед бактерій процес споруляции, і в цьому плані вони становлять значний теоретичний і практичний інтерес. B. subtilis мають важливе практичне значення: вони широко використовуються в різних процесах ферментації при промисловому отриманні антибіотиків і ферментів і в цьому відношенні володіють рядом цінних властивостей, таких як здатність секретувати синтезується білковий продукт у культуральну рідину, здатність рости на дешевих субстратах і володіти продуктивністю на один-два порядки вище, ніж у грамнегативних бактерій-продуцентів.
Оскільки B. subtilis мають цілу низку описаних вище властивостей, для цього організму було розроблено безліч різноманітних векторних систем. У даній роботі переглянуті | основні типи векторних систем, за допомогою яких можна проводити різні генетичні маніпуляції в клітинах B. subtilis.
ПЕРЕГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ
Спочатку велика частина векторів для B . subtilis створювалася на основі геномів помірних фагів (таких, як rho11 і phi105), тому що вони володіли більшою стабільністю, ніж вектори на основі плазмід, реплицируется за типом котиться кільця (rolling-circle-replication, RCR-плазміди) (Негрук, 1991). У Нині більшість векторів конструюється на основі репліконов тета-плазмід, що володіють високою структурною і сегрегаційній стабільністю. Крім того, останнім часом розроблено ряд так званих геномних векторів надають додаткові можливості в порівнянні з плазмідними векторами.
1.1. Клонуючі вектори
У штамах B . subtilis міститься незначна кількість природних плазмід, причому більшість з них є кріптіческой. Однак з інших видів роду Bacillus , а також інших родів грампозитивних бактерій, було виділено безліч плазмід, здатних до автономної реплікації в клітинах B . subtilis . Спочатку плазмідні вектори для B . subtilis конструювалися на основі дрібних (Розміром менше 10 kb) плазмід різних грампозитивних бактерій, в першу чергу на основі плазмід, виділених з Staphylococcus aureus (pC194, pE194, pUB110 та ін.) Однак векторні молекули, отримані на основі таких плазмід, проявляли високу структурну нестабільність, і з їх допомогою можна було клонувати тільки короткі сегменти ДНК, а довгі сегменти часто піддавалися перебудов (Michel et al., 1980; Ehrlich et al., 1986). p> Нестабільність дрібних плазмід в клітинах B . subtilis обумовлена ​​механізмом їх реплікації. Зазначені плазміди...
