овному такі помилки виникають на етапі забору матеріалу для дослідження. Так надлишок слизу або гемоглобін можуть викликати інгібування реакції, що призведе до помилково негативні результату. p align="justify"> Мета курсової роботи:
збір і систематизація літературного матеріалу з питання застосування молекулярно-генетичних методів для вирішення завдань медицини та ветеринарії.
Завдання:
. Вивчення історії становлення сучасних молекулярно-генетичних методів;
. Ознайомлення з методичними аспектами різних варіантів ПЛР;
. Характеристика напрямів використання ПЛР-діагностики. br/>
Глава 1. Огляд літератури
.1 Історія винаходу та принцип ПЛР
Вперше ідею полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) озвучив Каррі Мюлліса (Kary Mullis) навесні 1983 будучи співробітником біотехнологічної компанії Cetus Corporation , розташованої в Каліфорнії, США. Перша публікація, яка містить короткий опис методу ПЛР, вийшла в 1985 році в Science, в даній роботі метод був використаний для детекції мутацій в тотальній ДНК людини для пошуку мутацій, пов'язаних з серповидноклітинній анемією. Протягом двох наступних років автори методу опублікували масу робіт, в яких метод ПЛР був описаний більш докладно.
Появі методу проведення полімеразної ланцюгової реакції передували певні досягнення молекулярної генетики: до того часу вже були розшифровані нуклеотидноїпослідовності геномів ряду мікроорганізмів і виділені специфічні.
Також появі ПЛР багато сприяло відкриття унікального ферменту ДНК-полімерази (або taq-полімерази). Саме цей фермент каталізує і В«контролюєВ» всі процеси під час проведення аналізу методом ПЛР. Особливість цього ферменту - він термостабілен, виключно термостійкий: він витримує нагрівання до температури кипіння без втрати активності, а В«улюбленийВ» його температурний режим під час роботи - 72? С. Багато реакції при проведенні ПЛР йдуть майже виключно при підвищеній температурі (Бутенко, 2005). br/>
.2 Переваги ПЛР і можливі помилки при реалізації методики
Одним з найважливіших критеріїв діагностичної ефективності будь-якого лабораторного аналізу є показник В«чутливостіВ». При цьому слід розрізняти аналітичну та діагностичну чутливість. Аналітична чутливість, стосовно до ПЛР, являє собою те мінімальна кількість копій (геномних еквівалентів-р/е) ДНК або РНК в одному мілілітрі розчину зразка, яке може бути визначено даної тест-системою. Більшість комерційних ампліфікаціонних тест-системи дозволяє знайти в біологічній пробі шукану НК якщо її концентрація становить не менше кількох сотень р/е копій в 1 мл зразка. Наприклад, аналітична чутливість більшості тест-системи для ВІЛ-1 складає 300-...
