розділених на групи по статевої приналежності і змістом ртуті в стінці кишечника.
У лабораторних умовах кишечник очищали від жиру і прилеглих тканин, відокремлювали медіальну частину кишечника і розрізали її уздовж. За допомогою пластмасового скребка видаляли хімус, а слизову оболонку кишечника промивали охолодженим до 2-4 ° С розчином Рінгера для теплокровних тварин (152 ммоль NaCl, 5,7 ммоль KCl, 26 ммоль CaCl2, 1,8 ммоль NaHCO3, рН 7,4) для видалення залишків хімусу. Кишкову стінку, поряд з хімусом, використовували для приготування вихідного гомогената. Проби ферментативно-активних препаратів готували за допомогою скляного гомогенізатора, додаючи охолоджений до 2-4 ° С розчин. Розчини субстратів (1,8% крохмалю і 50 ммоль сахароза) готували на такому ж розчині Ринзі-ра. Гомогенати і розчини субстратів інкубували при постійному перемішуванні протягом 30 або 60 хв при температурі 20 ° С, рН 7,4.
У стінці і химусе кишечника визначали in vitro активність гликозидаз: мальтази КФ 3.2.1.20 (глюкозооксидазний метод), сахарази КФ 3.2.1.48 (метод Нельсона), а також амілолі-тичні активність, яка відображатиме сумарну активність ферментів, гидролизующих крохмаль: а-амілази, глюкоамілази КФ 3.2.1.3 і мальтази КФ 3.2.1.20 (метод Нельсона) [11]. Для визначення активності мальтази застосовували набір для клінічної біохімії «Фотоглюкоза» (ТОВ «Імпакт», Росія). Ферментативну активність визначали у п'яти повторностях і виражали в мікромолях продуктів реакції, що утворюються за 1 хв інкубації ферментативно-активного препарату і субстрату в розрахунку на 1 г вологої маси тканини (мкмоль / г-хв). Визначення ртуті проводили атомно-абсорбційним методом з використанням аналізатора ртуті РА - 915. Результати представлені у вигляді середніх і їх помилок (M ± m). Достовірність відмінностей оцінювали за допомогою однофакторного дисперсійного аналізу (ANOVA, LSD-тест) при p=0,05.
Результати та обговорення
Найбільше накопичення ртуті в стінці кишечника і химусе рудої полівки із діброви і вільшаника суттєво перевищувала аналогічні показники у гризунів з більш сухого біотопу осичняк (табл. 1, 2). У окремих самців із діброви вміст ртуті досягало 60 мкг / кг сирої маси кишки і 126 мкг / кг сирої маси хімусу. Вміст ртуті в грунтах досліджених біотопів знижувалося в ряду вільшняк> діброва> осичняк [5] і позитивно корелювало з накопиченням ртуті в кишечнику (r=0,77) і химусе (r=0,60) самок. Найбільші відмінності в рівні накопичення ртуті також відзначені у особин більш вологих біотопів: вміст ртуті в кишечнику відрізнявся в 43 рази, в химусе - в 84 рази, в той час як у особин з осичняків - лише в 3 і 18 разів відповідно.
Рівень активності гликозидаз в тканинах і химусе кишечника полівок досить високий, що добре узгоджується з високим вмістом вуглеводів в їжі цих тварин. Порівняння ферментативної активності у самців і самок з близьким вмістом ртуті в кишечнику всередині одного біотопу дозволило виявити статеві відмінності (табл. 1). Так, при меншому рівні накопичення ртуті у самок з осичняків амілолітіче-ська активність і активність мальтази вище на 38 і 29%, активність сахарази, навпаки, нижче на 33%, ніж у самців. У самок з вільшаника амилолитическая активність на 19% нижче в порівнянні з самцями, активність мальтази і сахарази приблизно дорівнює. Амілолітична активність в химусе самок з осичняків і вільшаника на 40 і 23% нижче, ніж у самців, зміни активності і...
