чутливі клітини молекул ДНК вірусів і плазмід в біологічно активній формі, що забезпечує реплікацію молекул ДНК та / або експресію кодованих ними генів;
відкриття низки ферментів, що використовують ДНК як субстрат каталізуються ними реакцій, особливо рестриктаз і ДНК - лигаз.
Об'єднання на початку 1970-х рр.. до того незалежно розроблюваних методів дозволило створити сучасну стратегію генетичної інженерії, суть якої полягає в наступному:
1) у невелику молекулу ДНК, здатну реплицироваться в клітці автономно від хромосоми (плазміду або вірусну ДНК), ферментативно вбудовують фрагменти молекул ДНК будь-якого досліджуваного організму або штучно синтезовані сегменти ДНК;
) утворюються при цьому молекули (гібридні ДНК), вводять в чутливі прокариотические або еукаріотичні клітини, де вони реплікуються, розмножуючи у своєму складі вбудовані фрагменти ДНК;
) певними методами відбирають клони клітин або вірусів, що містять індивідуальні типи молекул гібридних ДНК;
) виявлення гібридні ДНК піддають різнобічному структурно-функціональним вивченню, особливу роль при цьому відіграють високоефективні методи розшифровки послідовності нуклеотидів (секвенування) фрагментів ДНК.
Молекули ДНК, створювані методами генетичної інженерії, часто називають рекомбінантними ДНК (рекДНК). У даній роботі конструюються in vitro молекули ДНК ми будемо називати гібридні ДНК, щоб підкреслити їх відмінність від молекул, утворених in vivo в результаті природної рекомбінації природних ДНК по областям гомології. Детермініруемие гібридними генами «складові» білки, що складаються з ковалентно пов'язаних амінокислотних послідовностей різних білків, будемо називати химерними. Генетична інженерія значно розширила експериментальні кордону молекулярної біології, оскільки дозволила вводити в різні типи клітин чужорідну ДНК і досліджувати її функціонування в гетерологічние оточенні. Це дало можливість виявляти общебиологические закономірності організації і вирази генетичної інформації в різних організмах. Даний підхід відкрив перспективи створення принципово нових мікробних продуцентів біологічно активних речовин, а також тварин і рослин, що несуть функціонально активні чужорідні гени. Більше того, з'явилася можливість штучно створювати гени, що кодують химерні поліпептиди, що мають властивості двох або більше природних білків. Все це дивним чином революционизировало біологічну науку і дало потужний імпульс розвитку біотехнології.
Глава 2. Застосування генної інженерії в медицині
2.1 Синтез в рослинах чужорідних білків медичного призначення
Для медичних цілей рослини використовують тисячі років, але генетична інженерія дозволила створити нові рослини, білкові продукти яких важливі для терапії різних захворювань. Гени терапевтично важливих білків людини і тварин можна вводити в різні системи експресії, кожна з яких має свої переваги і недоліки. Ідеальною є система експресії, яка найбільш безпечна і забезпечує продукцію біологічно активного продукту за мінімальною ціною. В системі клітин ссавців можуть синтезуватися білки людини і...
