трацією 0,40 моль/дм3 до концентрованого розчину креатинін-пікратний комплексу, концентрація креатиніну в якому 0,014 моль/дм3, комплекс руйнується протягом 15 хвилин, оптична щільність знижується до нуля.
2.10 Перевірка правильності розроблюваної методики
Перевірку правильності розроблюваної методики проводять методом «введено-знайдено».
2.10.1 Підготовка проби до аналізу
Зразок сирого м'яса (яловичина, тазостегнова частина), що не містить жиру і сполучних тканин, зважують на аналітичних вагах (2,00000 ± 2,5? 10-5) м. Стандартну добавку креатину вводять в зразок м'яса шляхом вкаливанія хроматографическим шприцом. Добавку вводять у різні частини проби для рівномірного розподілу стандартного розчину. Зразок залишають в холодильній камері на 5 годин.
Пробу м'яса з добавкою гомогенизируют блендером в чашці до отримання пастоподібної маси і переносять кількісно в конічну колбу місткістю 100,0 см3. Чашку блендера промивають від залишків проби 20,00 см3 насиченого розчину пікринової кислоти, кислоту із залишками м'яса переносять в конічну колбу, і об'єднують з пробою м'яса. Колбу з пробою м'яса поміщають на шейкер для струшування протягом 1 години. Далі вміст колби фільтрують через обеззоленний фільтр «Синя стрічка» в мірну колбу місткістю 100, 0 см3. Фільтр промивають насиченим розчином пікринової кислоти і доводять до мітки пікринової кислотою. Отриманий фільтрат об'ємом 100,0 см3 ретельно перемішують.
2.10.2 Визначення вмісту креатиніну в пробі
Аліквоту фільтрату 1,50 см3 переносять в мірну колбу місткістю 25,0 см3, доливають 1,50 см3 насиченого розчину пікринової кислоти і 0,12 см3 розчину гідроксиду натрію з концентрацією 2,455 моль/дм3. Через 11 хвилин розчин доводять до мітки дистильованою водою, перемішують і вимірюють аналітичний сигнал на КФК - 3 при нм. Як розчин порівняння використовують дистильовану воду. Отриманий аналітичний сигнал А 1 - адитивна додавання сигналу поглинання креатинін-пікратний комплексом і сигналу поглинання комплексів пікринової кислоти з іншими речовинами.
Для поліпшення селективності реакції в концентрований розчин креатинін-пікратний комплексу доливають 0,65 см3 хлороводневої кислоти з концентрацією 0,40 моль/дм3. Через 15 хвилин розчин доводять до мітки дистильованою водою, перемішують і вимірюють аналітичний сигнал. Розчином порівняння служить неодружена проба: у колбу місткістю 25,00 см3 доливають 1,50 см3 насиченого розчину пікринової кислоти, 0,12 см3 розчину гідроксиду натрію з концентрацією 2,455 моль/дм3 і
, 65 см3 хлороводневої кислоти з концентрацією 0,40 моль/дм3, доводять до мітки дистильованою водою.
Отриманий аналітичний сигнал А2 - поглинання комплексів пікринової кислоти з іншими речовинами. Аналітичний сигнал креатинін-пікратний комплексу знаходять по різниці аналітичних сигналів розчину проби в лужному і в кислому середовищі за формулою (2).
А=А1 - А2
Де А - оптична щільність креатинін-пікратний коплексу;
А1 - оптична щільність, вимірювана в лужному середовищі;
А2 - оптична щільність, вимірювана в кислому середовищі
Для визначення концентрації (С1) креатиніну в фотометрованих розчині використовують градуювальних графік (п. 2.4).
Вміст креатиніну в м'ясі обчислюють за формулою....
