дно (таблиця 4).
Таблиця 4 - Приклад розрахунку триплет-коду для ідентифікації рас несправжньої борошнистої роси [Tourvieille de Labrouhe, 2000, p.162]
Якщо після витримування заражених проростків у вологій камері спороношение не виявлялося на справжніх листках, було слабким на сім'ядолях, або не проявлялося взагалі, то растільні з проростками поміщалися у вологу камеру повторно. При негативному результаті оомицетов провокувався на освіту спороношения різким підвищенням температури з 16 - 17? С до +25? С на добу, а потім настільки ж різким її зниженням до 16 - 17? С. Після цього растільні знову поміщали у вологу камеру.
В окремих випадках повторно заражали лінії-диференціатор соняшнику згідно з методикою. Для цього використовували спороношение з проростків лінії, сприйнятливою до всіх рас, або лінії, що викликає сумнів.
3.2 Уточнення методики визначення расової приналежності ізолятів P. halstedii
При визначенні расової приналежності ізолятів P. halstedii виникали деякі проблеми, які вирішувалися шляхом повторної інокуляції ліній-диференціатор соняшничніка.
При ідентифікації рас P. halstedii, згідно з міжнародним стандартом, лінія-дифференциатор вважається сприйнятливою за умови наявності спороношения на справжніх листі її проростків. Але іноді, при наявності спороношения на сім'ядолях, воно на справжніх листках не виявлялося, або справжні листи взагалі не могли розвинутися через сильний інгібування заражених проростків патогеном. У таких випадках свіжоприготовленим інокулюм з таких ліній-диференціатор повторно заражалися аналогічні лінії. Наша практика показала, що якщо при першому тестуванні ізоляту спороношение на справжніх листках проростків лінії-дифференциатора відсутнє, але було рясним на сім'ядолях, то в результаті реінокуляціі спороношение виявлялося і на справжніх листках. Це узгоджується з висновками, до яких дійшли французькі колеги. Вони вважають лінію сприйнятливою за умови наявності спороношения на справжніх листках проростків лінії-дифференциатора, або за відсутності такого, але рясного - на сім'ядолях.
Періодично при ідентифікації польових ізолятів P. halstedii виявлялися рідко виявляються раси 100, 300, 310, 700. В таких випадках обов'язково проводилося перезараження ліній-диференціатор соняшнику свежеприготовленной суспензією з спороношения цих ізолятів. Повторне тестування ізолятів, спочатку віднесених до цих рас, показувало неточність первинної ідентифікації. Насправді більшість ізолятів рас 100, 300 і 310 чинився належить до 330-й, а ізолятів 700-й - до 710-й. Аналогічно - при ідентифікації у польових ізолятів оомицетов «нових», що викликають сумнів, кодів вірулентності (наприклад, 200, 230, 500 тощо). Жоден з таких кодів вірулентності не підтверджено згодом.
Головна причина зазначених ситуацій - недостатня інфекційна навантаження при першому зараженні ліній-диференціатор соняшника: спороношение на зібраному матеріалі могло бути незначним або життєздатність патогена знизилася при зберіганні.
Також кожен з ізолятів сімсот тридцятим раси був перевірений ще раз для виключення можливого змішування в такому ізоляти рас 330 і 710. Спорангіальной суспензі...
