дньо розводять ізотонічним розчином натрію хлориду у співвідношенні 1: 4. Мазок висушують на повітрі, не фіксують і забарвлюють протягом 2-3 хв формолгенціановим фіолетовим (10 мл 40% формаліну і 1,5 г генциани-вого фіолетового). Замість формолгенціанового фіолетового можна застосовувати 0,33% водний розчин фуксину і 3% лужний розчин метиленового синього. При мікроскопії на чорно-сірому тлі видно незабарвлені капсули, в яких розташовуються клітини бактерій фіолетового кольору. Пневмококки розташовані попарно, їх клітини мають витягнуту форму у вигляді полум'я свічки і оточені капсулою. Таким чином, на підставі мікроскопії можна судити про наявність збудника. Однак більш достовірні дані отримують при бактеріологічному дослідженні.
Рис. 4. Пневмококки в мазку з мокротиння
Бактеріологічне дослідження. Для виділення чистої культури 5-10 мл крові сіють у сироватковий бульйон (1 частина сироватки і 3 частини МПБ, рН 7,2-7,4) або в цукровий бульйон, або в спеціальну середу, 100 мл якої містять 1,8-2 , 0 мл агар-агару, 70-75 мл гідролізату по Хоттінгера або гідролізату казеїну (1,8-2,0 г/л амінного азоту), 20-25 мл гідролізату бичачих сердець (1,40-1,60 г/л амінного азоту), 4 5 мл дефибринированной крові коня, 0,5-0,7 мл екстракту пекарських дріжджів. Після 18-24-годинної інкубації в термостаті роблять пересів в чашку з 10% кровянимагаром. Спинномозкову рідину центрифугують і осад сіють на кров'яний агар. Колонії пневмокока нагадують колонії стрептокока: дрібні, майже плоскі, непрозорі, з ореолом зеленого кольору, рідше гемолізу. Характерно вдавление в центрі колонії.
Рис. 5. Пневмококки в чистій культурі з бульйону
Безпосередній посів матеріалу на живильні середовища (мокрота, гній) зазвичай не дає позитивного результату, тому що в присутності сапрофітів, особливо гнильних мікроорганізмів, зростання пневмококів пригнічується. Тому гній і мокроту попередньо обробляють - вибирають грудочки, розтирають їх у фарфоровій ступці, додаючи 1 мл ізотонічного розчину натрію хлориду, і вводять внутрішньочеревно білим мишам. Миші дуже чутливі до пневмококи, вони гинуть від пневмококової септицемії через 18- 72 ч. Труп миші розкривають, кров із серця, шматочки внутрішніх органів і перитонеальну рідину сіють в чашку з кров'яним агаром і в пробірку з сироватковим бульйоном.
На підставі морфологічних і культуральних властивостей важко диференціювати пневмококи від зеленящіх стрептококів. Для цього застосовують реакцію розчинення пневмококів жовчю: 1 мл бульонной культури вносять у стерильну пробірку і додають 0,5 мл бичачої жовчі. Через 10-15 хв перебування в термостаті відбувається повний лізис пневмококів. Контролем є пробірка з бульонной культурою пневмокока без жовчі. Зеленящий стрептокок, колонії якого схожі на колонії пневмокока, що не лизируется жовчю. При наявності лізису виробляють посів в середовищі «строкатого» ряду. На відміну від стрептокока, пневмокок розщеплює інулін з утворенням кислоти і утворює аміак з аргініну.
На підставі проведеного дослідження можна остаточно визначити вид виділеного мікроорганізму. Враховується ланцетовидная форма диплококів, наявність капсули в нативному матеріалі, висока вірулентність для білих мишей, розчинення жовчю і розщеплення інуліну.
Профілактика і заходи боротьби
Профілактика і заходи 6орьби засновані на підвищенні резистентності організму шляхом дотримання зоогігієнічних і вететерінарно-санітарних правил догляду та утримання вагітних тварин і новонародженого молодняку. У неблагополучних господарствах корови, хворі на мастит і ендометритом, не повинні мати контакту з молодняком, їх молоко телятам НЕ споюють. З профілактичною метою новонародженим телятам на 2-у добу вводять антідіплококковую сироватку в профілактичній дозі, а на 8-е добу. вакцинують формолвакцина протівдіплококковой септицемії телят, ягнят і поросят. Стельним коровам і нетелів за 1-2 місяці до отелення внутрішньом'язово двічі з 7-добовим проміжком вводять по 30 мл вакцини. Ягнят і поросят вакцинують з 10-добового віку двічі з 7-денним інтервалом. Поросят і супоросних маток можна імунізувати полівалентної формолвакцина проти паратифу, пастереллез і диплококковой інфекції.
Для попередження захворювання важливе значення має повноцінне годування тварин, підтримання нормального санітарного режиму в приміщеннях для молодняка і їх систематична профілактична дезінфекція. Маток з маститами, ендометритами ізолюють і лікують, молоко, отримане від них, знищують. Приміщення піддають механічному очищенню та дезинфекціх 2% -м розчином карболової кислоти.
Лікування
Хворих тварин лікують антідіплококковой сироваткою в поєднанні з антибіотиками і сульфаніламідними препаратами.
Біопрепарати
