ічну дію. Токсини загальної дії (ерітрогенний, пірогенний, скарлатинозний) є основними токсичними компонентами стрептококів. Токсини місцевої дії відносять O і S стрептолізин, гіалуронідазу, стрептокиназу, протеїназу.
1.2 Методи дослідження стрептококів
Бактеріологічне дослідження
Для встановлення діагнозу при гострих стрептококових інфекціях (за винятком скарлатини з типовою клінічною картиною) потрібно проводити бактеріологічне дослідження. При підозрі на сепсис сіють біля ліжка хворого 10-15 мл крові у флакон, що містить 100-150 мл цукрового бульйону (співвідношення крові і середовища1: 10). Кращі і надійні результати дають посіви крові в середу Кітта-Тароцці з напіврідким агаром. У ньому будуть рости і анаеробні стрептококи. Посіви крові інкубують в термостаті при 37 ?. При зростанні стрептококів на дні середовища з'являється осад. У середовищі може і утворитися газ. В мазках з осаду виявляють грампозитивні стрептококи у вигляді довгих ланцюжків. Пневмококки розташовуються короткими ланцюжками або парно у вигляді ланцетовідних клітин, повернутих один одного потовщеними кінцями. При відсутності росту посіви витримують в термостаті в теченіе3-4 тижнів, періодично проводячи бактеріоскопію. Культуру, що виросла після бактеріоскопії пересівають в чашку з кров'яним агаром для визначення типу гемолізу. Через 18-20 годин виростають типові колонії, оточеній зоною гемолізу. Щоб краще і точніше ідентифікувати виділені гемокультури стрептококів, колонії з кров'яного агару рекомендують відсівати на МПА, молоко з метиленовим синім, жовчний бульйон. Далі різні види стрептококів можна диференціювати за біохімічними властивостями. Раневое зміст, мокротиння, слиз із зіву і носа, зібрані ватним тампоном сіють на кров'яний агар. Матеріал наносять на середу в невеликій кількості, а потім петлею або шпателем розсіюють його легкими штрихами по всій поверхні. Не рекомендується втирати досліджуваний матеріал в агар. Для підвищення частоти посіву, тампони занурюють у пробірку з середовищем Кітта-Тароцці, до якого додають напіврідкий агар і 2-3 краплі крові кролика. Посіви інкубують 3-4 години при температурі 37? З градусах, а потім висівають на чашки з кров'яним агаром.
CAMP-тест. Велика частина стрептококів групи В продукує CAMPфактор, який при взаємодії з? - Лізином золотистого стафілокока викликає синергічну посилення лізису еритроцитів. Для постановки тесту через центр чашки з кров'яним агаром суцільною лінією наносять добову бульйонну культуру продуцирующего? - Лізин S.aureus. Випробовувані штами стрептококів наносять перпендикулярно до лінії посіву стафілокока. В якості контрольних використовують штами S.agalactiae (позитивний контроль) і S.pyogenes (негативний контроль). При виявленні в місці перетину посівів стрептокока і стафілокока через 18 годин інкубації при температурі 37? C зони синергічного збільшення гемолізу у вигляді «крила метелика» роблять висновок про наявність в пробі S.agalactiae.
Серологічне дослідження
При хронічних стрептококових інфекціях виділити збудника, як правило, не вдається, особливо при тривалому лікуванні хворих антибіотиками та іншими протимікробними препаратами. У такому разі проводять серологічні дослідження: визначення стрептококового антигену в сироватці крові та сечі, титрування антитіл до О-стрептолізин, гіалуронідази і ДНК-ази. Антиген стрептококів визначають в РСК. Необхідні для цього антистрептококових сироватки отримують шляхом гіперімунізаціі кроликів убитої культурою?-гемолитический стрептококів серогрупи А. Титром антигену вважають те найбільше розведення сироватки, яке затримує гемоліз. Кращі результати отримують при постановці РСК на холоді. Останнім часом для виявлення стрептококових антигенів в сироватці крові досить успішно використовують метод ІФА. При визначенні стрептококових антигенів у сечі хворих використовують реакцію преципітації. Осад ранкової порції сечі після центрифугування обробляють протівострептококкових преципитирующие сироваткою. Результат враховують через годину при кімнатній температурі. Стрептококові антигени в сироватці крові та сечі часто виявляють при скарлатині, ангіні, ревматизмі. Визначення антитіл проти О-стрептолізин (антистрептолизина-О) проводять внесенням робочої дози стандартного препарату О-стрептолізин в ряд пробірок з кратними розведеннями сироваток (1:25, 1:50, 1: 100 і т.д.). Суміш інкубують в термостаті протягом 15 хв, потім в усі пробірки вносять по 0,2 мл 5% суспензії еритроцитів кролика і знову поміщають у термостат на 60 хв. При наявності антистрептолизина в крові хворих гемолізу не настає. Пробірка з найбільшим розведенням сироватки, в якій є виражена затримка гемолізу, містить 0,5 AO (антистрептолизина-О). Для визначення антитіл проти гіалуронідази (антігіалуронідази) у сироватці хворих в різних розведеннях вносять станда...
