дартній температурі (20 С) і в'язкості води (w).
Електронно-мікроскопічний метод визначення молекулярної маси ДНК заснований на вимірюванні довжини витягнутих молекул ДНК. Відомо, що на 0,1 нм протяжності її молекули припадає маса, рівна 197 Да. Множачи це значення на експериментально знайдену довжину, знаходять значення молекулярної маси. Молекулярна маса еукаріотичних ДНК вище, ніж у ДНК прокаріот (наприклад, в одній з хромосом плодової мушки дрозофіли вона досягає 7,9 х 1 010). Крім того, до складу мітохондрій і хлоропластів входять кільцеві молекули ДНК з молекулярною масою 106-107. ДНК цих органел називають цитоплазматичної; вона становить приблизно 0,1% всієї клітинної ДНК.
Зміст ДНК в клітинах організму певного виду відрізняється незвичайним постійністю, тоді як міжвидові відмінності за цим показником досить великі. Кількість ДНК у клітині вимірюється пикограмм (+1012 г), коливається від 0,01 пг у кишкової палички до декількох пікограмів в гаплоїдних клітинах вищих організмів.
Залежно від місця локалізації ДНК у клітині розрізняють ядерну, мітохондріальну, хлоропластна, центріольную і епісомальной ДНК. Ядерна ДНК у еукаріот різко превалює над ДНК інших субклітинних структур. Так, в мітохондріях виявлено від 0,5 * 106 до 5 * 1016 г ДНК, в хлоропластах - від 10? 16 до 150 * 10? 16, а в центриолях - 2 * 1016 г, що становить кілька відсотків від ядерної ДНК. [8] У такому ж співвідношенні знаходиться вміст ДНК у бактеріальній хромосомі і Епісоми - позахромосомних, самостійно реплицирующихся детерминантах спадковості у мікроорганізмів, що забезпечують перенесення генетичної інформації, наприклад, про стійкість до антибіотиків (інакше їх називають R-факторами, тобто факторами резистентності ). Обговорюється питання про існування екстрахромосомной ДНК, що транспортується, або комунікаційної, ДНК, цитоплазматичної мембранної ДНК, дрібнодисперсного сверхскрученной ДНК. За функціональним призначенням розрізняють рибосомальної ДНК (рДНК) і сателітну ДНК (стДНК).
Крім внутрішньоклітинної ДНК існує також ДНК, що входить до складу вірусів і бактеріофагів. Кількість її у вірусах значно нижче, ніж у клітинах бактерій (тисячні частки пікограма).
Молекулярні маси РНК визначають тими ж методами, що і ДНК, але, крім того, використовують електрофорез в поліакриламідному гелі, оскільки пробіг РНК в гелі обернено пропорційний їх молекулярним масам. Що стосується змісту та локалізації РНК в клітинах, то воно не відрізняється ні одноманітністю, ні стабільністю: в клітинах, де йде інтенсивний біосинтез білків, вміст РНК в кілька разів перевищує таке ДНК (наприклад, в печінки щура РНК в 4 рази більше, ніж ДНК ), але там, де синтез білка малий, співвідношення ДНК і РНК може бути зворотним (наприклад, в легенях щури РНК в 2 рази менше, ніж ДНК).
За функціональним значенням і молекулярним масам, так само як і по локалізації в клітинному вмісті, РНК ділять на наступні види.
. Транспортні РНК (тРНК) відрізняються порівняно невисокими значеннями молекулярних мас (25-30 тис. Дальтон). тРНК становлять 10% від усіх РНК. Ці РНК локалізовані в гіалоплазме клітини, ядерному соку, безструктурної частини хлоропластів і мітохондрій і набувають специфічну конфігурацію у вигляді листа конюшини. Вони здійснюють кодування амінокислот і перенесення їх в рибосомальних апарат клітини в процесі біосинтезу білків.
. Рибосомальні РНК (рРНК) характеризуються в основному великими молекулярними масами (1-1,5 млн. Дальтон), молекули великі, до їх складу входить до 5000 нуклеотидів. Вони локалізовані в рибосомах, будучи їх структурною основою і виконуючи в них різноманітні функції (формування активного центру рибосоми; Забезпечення взаємодії рРНК і тРНК).
. Інформаційні, або матричні, РНК (мРНК) володіють молекулярними масами, варьирующими в широких межах (від 300 000 до 4 * 106). мРНК синтезуються в ядрі в процесі транскрипції на певній ділянці молекули ДНК (гені). Функцією мРНК є перенесення генетичної інформації про структуру білка від ДНК до місця синтезу білка, на рибосоми.
. Вірусні РНК відрізняються різноманітними і високими молекулярними масами, лежачими в основному в межах декількох мільйонів дальтон. Вони є складовими частинами вірусних та фагових рибонуклепротеіну, несуть всю інформацію, необхідну для розмноження вірусу в клітинах господаря.
У сучасній літературі обговорюється питання про доцільність виділення в окремі категорії ще кількох видів РНК: ядерної, хромосомної, мітохондріальних, низькомолекулярних регуляторних, антисмислових.
2.4 Фізико-хімічні властивості нуклеїнових кислот
У воді ДНК утворює в'язкі розчини, при нагріванні таких розчинів до 60 ° С або при дії лугів подвійна спіраль розпадається на дві складові ланцюги, які знову можуть об'єднатися, якщо повернутися до вихідних умов. У слабокислих умовах відбувається гідроліз, в результаті частково розщеплюються фрагменти -Р...
