ого і довгастого мозку хворих тварин.
Найбільш споживані в наст, час культуральні пробирочную методи вірусологічної та серологічної діагностики як найдешевші і доступні для обстеження великого числа проб. Завдяки цілої серії досліджень Ендерса, Солка, Янгнера, Мельника, Дульбекко і багатьох інших в 1949-1955 рр.. були розроблені ефективні методики виділення, розмноження і ідентифікації ентеровірусів в культурах клітин.
Виділення і розмноження вірусу поліомієліту для лабораторних цілей можливо в первинних культурах нормальних тканин від людини (хірургічні відходи та ембріони) або різних видів мавп. Для цього найчастіше використовувалися фібробласти шкірно-м'язової тканини, клітини нирок, насінники, амніону та ін Крім того, можуть з успіхом використовуватися вторинні культури або лабораторні лінії безперервно зростаючих клітин ракового походження (часто застосовувалися лабораторні лінії клітин людського раку: Не1а, нер-2, КВ, НЬ8, Детройт-6 та ін), а також безперервні лінії клітин, що походять від нормальних тканин (напр., клітини амніону людини і клітини СОЦ-з серця мавпи ціномольгус). Крім того, виявилося, що в ряді випадків безперервні лабораторні лінії клітин, що походять від тварин (кроликів, свиней), що не сприйнятливих до поліомієліту, можуть ставати повністю сприйнятливими до зараженню поліовірусом в результаті відбувається трансформації (можливо ма-лігнізаціі тканини) в процесі тривалих пасажів безперервно зростаючих клітин.
Культури клітин в підходящої рідкому середовищі для розмноження поліовірусу можуть виготовлятися асептично різними методами (суспензія фрагментів тканини, одношарова клітинна мембрана на склі; фіксування фрагментів у курячої плазмі; покриття агаром клітинного шару на склі тощо) в герметично закритих стерильних судинах. Додавання невеликої кількості антибіотиків (100-200 ОД пеніциліну, 50 ЦГ стрептоміцину на 1 мл середовища) надійно охороняє більшість асептично приготованих культур клітин від випадкового проростання мі-Кробу-контоменантами з повітря.
Про присутність активного поліовірусу в зростаючої культурі клітин можна судити з наступаючою дегенерації клітин в результаті цитопатогенного дії вірусу. При цьому необхідно порівняння з контрольними незараженими клітинами і подальша перевірка специфічності цитопатогенного ефекту в досвіді нейтралізації типової імунною сироваткою.
Крім того, цитопатогенну дію поліовірусу у суспензії клітин можна зареєструвати за допомогою спостережень за змінами кольору фенолрот або іншого індикатора рН середовища, а саме клітини у суспензії, яка не містить поліовірусу, поступово протягом декількох днів зрушують рН середовища в кислий сторону і колір фенолрот змінюється з червоного в жовтий; в той же час в пробірках з активним вірусом поліомієліту клітини швидко дегенерують, метаболізм припиняється, кислотність середовища не змінюється, і вихідний червоний колір середовища (з індикатором фенолрот близько 0,004%) зберігається до кінця сп...
