бін безпосередньо реагує з диазотированного сульфаниловой кислотою, а загальний білірубін - у присутності кофеїнового реагенту з утворенням забарвленого Азосполуки. Інтенсивність забарвлення реакційного середовища пропорційна концентрації білірубіну і вимірюється фотометричним при довжині хвилі 535нм (500-560Нм).
Досліджуваний матеріал: сироватка крові без слідів гемолізу. Проби стабільні 2 години при кімнатній температурі в захищеному від світла місці.
Склад набору:
Реагент № 1: Кофеїновий реагент (200мл). p> Реагент № 2: Сульфаниловая кислота (55мл). p> Реагент № 3: Натрію нітрит (2мл).
Реагент № 4: Фізіологічний розчин (250мл). p> Калібратор: 85,5 мкмоль/л (у 2мл дистильованої води). p> Підготовка реагентів до процедури аналізу та їх стабільність:
Діазореактів: змішайте реактиви № 2 і № 3 у співвідношенні 100:2,5. Зберігати в посуді з темного скла при температурі 2-8 0 С.
Вміст флакона з калибратором розчиніть в 2мл дистильованої води. Після повного розчинення концентрація білірубіну дорівнює 85,5 мкмоль/л. Зберігати в захищеному від світла місці при температурі 2-8 0 С.
Процедура аналізу:
Досвідчена проба
Контрольна проба
Калібрувальна проба
Загальний білірубін
Прямий білірубін
сиворткамі, мл
Реагент № 1
Реагент № 4
Калібратор
Діазореагент
0,2
1,4
0,2
-
0,2
0,2
-
1,6
-
0,2
0,2
-
1,8
-
-
-
1,4
0,2
0,2
0,2
Проби ретельно перемішайте. Для визначення прямого білірубіну точно через 5 хвилин (При кімнатній температурі) виміряйте величину екстинкції дослідної проби проти відповідної контрольної проби при 535нм (500-560Нм). Для визначення загального білірубіну через 20 хвилин (при кімнатній температурі) виміряйте величину екстинкції дослідної проби проти відповідної контрольної проби при 535нм (500-560Нм). Екстинкцію калібратора виміряйте проти дистильованої води через 20 хвилин при 535нм. p> Розрахунок концентрації білірубіну в пробі (С):
, де
Е проби - Екстинкція дослідної проби;
Е калібр - Екстинкція калібрувальної проби;
85,5 - концентрація білірубіну в калібратори.
2.5 Визначення загального білка в крові
Визначення проводиться рефрактометрическим методом. За допомогою піпетки взяти краплю сироватки крові і нанести її на рефрактометр. Зняти свідчення. За допомогою таблиці перерахунку визначити вміст загального білка в сироватці крові.
3 Короткий огляд літератури з проблеми: Зміни біохімічних показників крові при вагітності
Біохімічний аналіз крові - це аналіз крові, що дозволяє оцінити роботу багатьох внутрішніх органів - нирок, печінки, підшлункової залози та ін Біохімія крові дозволить виявити порушення в роботі внутрішніх органів тоді, коли ще немає ніяких зовнішніх симптомів хвороби. Біохімічний аналіз покаже зміна в крові навіть якщо структура самого органу ще не постраждала, а порушення носять функціональний характер.
При істотні зміни біохімічного складу крові виникає загроза передчасних пологів, різноманітних порушень у розвитку дитини (наприклад, при дефіциті заліза мати і дитина страждають від анемії, тобто від нестачі кисню, при нестачі кальцію, фосфору і білків порушується розвиток опорно-рухового апарату дитини). Біохімічний аналіз крові дозволяє виявити перші ознаки такого серйозного ускладнення перебігу вагітності, як пізній гестоз, - за результатами аналізу можна судити про ступінь порушення функції нирок і, відповідно, проводити необхідне лікування.
Біохімічний аналіз крові роблять на самому початку вагітності, при постановці вагітної на облік. Повторно біохімію крові роблять в 30 тижнів вагітності, якщо не потрібно частіше. Набір досліджуваних позицій визначає лікар. Кров на біохімічний аналіз беруть з вени вранці натщесерце. Повинно пройти не менше 12 годин з останнього прийому їжі.
Загальний білок - показник білкового обміну, що відображає загальний вміст всіх білків в сироватці крові. Їх концентрація залежить в основному від співвідношення між швидкістю синтезу і виведення з організму. У вагітних, у зв'язку з можливими втратами білка з сечею через розвиток гестаційних ускладнень, необхідно визначати загальний білок і його фракції.
Концентрація загального білка в сироватці крові залежить від вмісту двох основних білкових фракцій - альбуміну і глобулінів...
