го кільця проводять реакції з ароматичними нітропохідними в лужному середовищі, з якими кардиотонические глікозиди утворюють забарвлені продукти: реакція легалам - з нітропрусидом натрію (червоне забарвлення), реакція Балье (Бальета, Бальжета) - з пікринової кислотою (оранжеве забарвлення), реакція Раймонда- з мета-динітробензолу (червоно-фіолетове забарвлення), реакція Кедді - 3,5-динітробензолу (фіолетово-синє забарвлення) та ін На кумаліновое кільце досі не знайдено специфічних реактивів.
На стероидную частина структури КГ проводять реакції з кислотними реагентами - утворюються сполучені ненасичені системи, що мають різні забарвлення: реакція Лібермана-Бурхардтом - з оцтовим ангідридом і концентрованої сірчаної кислотою (50:1) (рожеве-зелене-синє забарвлення), реакція Розенгейма - з 90%-ним водним розчином трихлороцтової кислоти (рожеве-бузкове забарвлення), з 20%-ним розчином трихлористе сурми в хлороформі (для прояву хроматограм).
Серед реакцій на вуглеводну частину більш специфічними є реакції на дезоксисахара: реакція Келлер-Кіліаном - з крижаною оцтовою кислотою, яка містить сліди сульфату заліза, і кислотою концентрованої сірчаної (волошково-синє забарвлення). Реакція позитивна, якщо 2-дезоксисахара займає крайнє положення в молекулі глікозиду або знаходиться у вільному вигляді.
Для ідентифікації кардіотонічних глікозидів на хроматограмах використовують реактиви на бутенолідное кільце, стероидную структуру.
Для ідентифікації буфадієноліди обов'язково зняття їх УФ-спектрів, де вони мають характерну смугу поглинання при 300 нм.
Кількісну оцінку якості сировини проводять методом біологічної стандартизації (для всіх видів) або з використанням фізико-хімічних методів аналізу (для сировини, з якого отримують індивідуальні кардиотонические глікозиди).
Біологічна стандартизація заснована на здатності кардіотонічних глікозидів викликати в токсичних дозах систолическую зупинку серця тварин. Активність серцевих засобів оцінюють у порівнянні з активністю стандартних препаратів і виражають в одиницях дії (ОД). Випробування проводять на тварин певної маси і підлоги: жабах (ЛІД), голубах (ГЕД), кішках (КЕД). Встановлюють найменші дози стандартного зразка та досліджуваного препарату (сировини), що викликають систолічну зупинку серця піддослідних тварин. Потім розраховують вміст одиниць дії в 1 г досліджуваного засобу (якщо це лікарські рослини або сухі концентрати), в одній таблетці (при випробуванні таблеток), в 1 мл (для рідких лікарських форм).
Стандартними зразками можуть бути спеціально виготовлені спиртові екстракти, які містять суму глікозидів і очищені від супутніх речовин (наперстянка пурпурна і великоквіткова, конвалія травнева) або індивідуальні кристалічні глікозиди: целанид-стандарт (наперстянка шерстиста); цимарин-стандарт (горицвіт весняний); строфантин-G-стандарт (строфант); ерізімін-стандарт (желтушник розлогий (ж. сірий)). Відбір тварин, їх зміст, техніка випробування описані в ГФ XI, а також у приватних ФС на лікарську рослинну сировину.
Фізико-хімічні методи засновані на поєднанні хроматографічного розділення очищеного екстракту, отриманого з сировини, Елюювання індивідуальних глікозидів та їх кількісному визначенні різними методами (фотоэлектроколориметрическим, спектрофотометрическим, флуоріметріческом та ін....
