льним наближенням до стану in vivo, в тому числі спонтанної агрегації тромбоцитів. Умовою об'єктивної оцінки є збереження тромбоцитів в неактивному стані до моменту дослідження, що пов'язано з дотриманням правил доаналітіческого етапи. Ця умова важко реально, так як при найменшій спробі вилучення тромбоцитів з кровоносної русла для in vitro діагностики вони відразу відгукуються активацією, проявляють агрегаційні властивості, вивільняють з гранул зберігання біологічно активні речовини і стають зовсім не тими клітинними елементами, які циркулюють в кровотоці.
У лабораторіях, які займаються вивченням системи гемостазу, як правило, використовуються два або кілька з наведених нижче методів, кожен з яких має свої переваги і недоліки.
Индуцированная агрегація може досліджуватися як у цільної крові, так і в тромбоцитарной плазмі. Останній метод є найбільш поширеним. Багато лабораторії використовують у своїй роботі багату тромбоцитами плазму, а основними індукторами є АДФ, колаген, арахідонова кислота, рістоцетін і епінефрин. При цьому кінцеві концентрації індукторів варіюють від кількох до мільйона разів.
Найбільш поширеним і доступним є фотометричний метод, запропонований GVR Born в 1962 році. Він заснований на вимірюванні светопропускающей здатності тромбоцитарной плазми, яка змінюється в часі при ініціюванні процесів активації та агрегації тромбоцитів різними індукторами. У кюветі приладу створюється модель пошкодження судинної стінки і активації кров'яних пластинок екзогенними індукторами. На основі фотооптичні агрегації проводиться оцінка активності фактора Віллебранда і діагностика хвороби Віллебранда. Однак метод не дає воспроизводимой і достовірної інформації про підвищену активність тромбоцитів.
Дослідження агрегаційної активності тромбоцитів може бути проведено з використанням лазерної технології - агрегометра БІОЛА (Росія). Метод дозволяє отримати більш повну інформацію про морфологічних і функціональних параметрах тромбоцитів, реєструвати парні агрегати, вимірювати середній розмір агрегатів тромбоцитів. Важливою особливістю є можливість оцінки спонтанної агрегації тромбоцитів.
Імпедансний метод дозволяє досліджувати агрегацію тромбоцитів у цільної крові і заснований на реєстрації зміни електричного опору. В якості індукторів агрегації використовуються стандартні агоністи. Перевагою даного методу є збереження всього комплексу умов, в яких відбувається функціонування тромбоцитів in vivo, включаючи клітинне оточення - лейкоцити і еритроцити. Метод дозволяє виявляти підвищену функціональну активність тромбоцитів і оцінювати передтромботичних стану при різних захворюваннях, у патогенезі яких це має значення.
Метод морфофункціональної оцінки внутрішньосудинної активації тромбоцитів по А.С.Шітіковой (1991) не використовує індуктори і спрямований на збереження морфології тромбоцитів, циркулюючих в кровотоці, для чого вони фіксуються глутеральдегідом в момент отримання проби крові, а потім вивчаються за допомогою фазово-контрастної мікроскопії. Таким чином, практично виключається активація тромбоцитів на доаналітіческом етапі і досліднику вдається «заглянути» в судинне русло і «побачити», в якому морфологічному стані тромбоцити циркулюють в кровотоці. Відомо, що морфологічні зміни кров'яних пластинок стадійні і відповідають їх функціональної активності. Метод довів сво...
