білків, чітко діляться на три групи по електрофоретичної рухливості білків.
Поділ методом тонкошарової хроматографії на силікагелі виявило наявність декількох флуоресціюючих компонентів гемолімфи. Кількісна реакція вказує на наявність дігідроксіхінонов. Концентрація вільних низькомолекулярних продуктів, що містять сульфгідрильні групи виявилася низькою ~ 10 - 6 М. У гемолімфі лялечок присутні водо- та жиророзчинні вітаміни (особливо велику кількість аскорбінової кислоти). Загальна кількість вільних амінокислот в рідкому вмісті лялечок китайського дубового шовкопряда становить 14-16 г/л, у тому числі виявлені (М ± m, ммоль/л) глутамін (19,07 ± 1,886), аланін (18,33 ± 2,601), гліцин (17,15 ± 0,907), серин (13,13 ± 1,711), треонін (10,28 ± 0,272), гістидин (10,26 ± 0,367), лізин (8,659 ± 0,586), валін (8,162 ± 0,193), пролін (5,586 ± 0,409), лейцин (4,763 ± 0,133), аспарагінова кислота (4,700 ± 0,561), ізолейцин (4,337 ± 0,145), тирозин (2,530 ± 0,230), цітрулін (2,152 ± 0,141), фенілаланін (1,043 ± 0,070), таурин (0,976 ± 0,112), глутамінова кислота (0,899 ± 0,081), метіонін (0,672 ± 0,083), бета-аланін (0,511 ± 0,029), етаноламін (0,227 ± 0,016), орнітин (0,044 ± 0,004). Методом високоефективної рідинної хроматографії не встановлені амінокислоти аспарагін, цистеїн і триптофан. У порівнянні зі спектром вільних амінокислот рослин в рідкому вмісті лялечок міститься більше гліцину, лізину, гістидину, проліну і глутаміну, а також знижений вміст глутамінової кислоти і фенілаланіну. Амінокислотний склад лялечок близький до біологічно повноцінним білкам молока [9-13].
У 2007 році був описаний антиоксидантний ефект гемолімфи лялечок китайського дубового шовкопряда [1, 14].
Виявилося, що антиоксидантний ефект гемолімфи лялечок шовкопряда істотно перевищує антиоксидантну активність гемолімфи виноградних равликів (Helix pomatia L.). При обчисленні інгібування утворення активних форм кисню (АФК) встановлено, що Гемолімфа лялечок китайського дубового шовкопряда ефективніше гемолімфи виноградних равликів в системі люмінол + HCl в 200 разів, люмінол + мієлопероксидаза хрону + Н 2 О 2 в 200 разів, генерації АФК нейтрофілами при адгезії в 700 раз, генерації АФК нейтрофілами при дії хемотаксического пептиду f Met-Leu-Phe в 300 разів і генерації АФК нейтрофілами при дії латексу в 4000 разів. Отже, унікальне антиоксидантну дію гемолімфи шовкопряда спостерігається при ступеня її розбавлення на кілька порядків більш високою, ніж у виноградних равликів.
У амінокислотний склад гемолімфи лялечок дубового шовкопряда входять тирозин і таурин. Ці амінокислоти є типовими фізіологічними субстратами мієлопероксидази (МПО) і виявляються в фаголизосомах нейтрофілів, де здійснюється внутрішньоклітинна деструкція патогенного матеріалу при інфекційному зараженні. Було показано, що багаті тирозином пептиди і білки можуть зв'язуватися з активним центром МПО та інгібувати Пероксидазну і галогеніруются активність ферменту щодо інших субстратів. Ймовірно, механізм антиоксидантної і антимікробної дії гемолімфи лялечок також включає зв'язування компонентів гемолімфи з реакційним центром МПО, що призводить до інгібування її активності [15-22].
Крім активних форм кисню і хлору надзвичайно високою реакційною здатністю і токсичною дією відносно біосистем володіють активні форми азоту, в першу чергу, пероксинітрит ONOO -, утворення якого також має місце при запаленні і при дії ксенобіотиків. Хемілюмінесцентним методом вдалося показати, що компоненти гемолімфи взаємодіють з ONOO -. Cубстратом нітрування в гемолімфі лялечок, мабуть, є тирозин, продуктом реакції - нітротирозину.
У дослідах in vitro показано, що рівень відновленого глутатіону в еритроцитах, підданих дії окислювача (1 мМ tBOOH) в присутність гемолімфи, був на 38% вище, ніж в відсутність протектора. Ще більш виражену антиоксидантну ефектом володіла Гемолімфа шовкопряда, безпосередньо витягнута з лялечки. Гемолімфа більш ніж на 65% інгібувати процес генерування продуктів пероксидного окислення ліпідів в еритроцитах у присутності 2 мМ tBOOH. Відомо, що индуцируемое органічним пероксидом окисне пошкодження еритроцитів пов'язано з генерацією алкоксильной і пероксильних радикалів у реакції окислювача з оксигемоглобіном.
Можна припустити, що компоненти гемолімфи безпосередньо взаємодіють з утворюються радикалами або інгібують процеси їх утворення [23-26].
Встановлено, що ні водний екстракт лялечок шовковичного шовкопряда ні його фракції не надали цитотоксичної дії на культуру клітин нормальних фібробластів людини.
Таким чином, показано, що гідрофільні компоненти гемолімфи лялечок дубового шовкопряда мають антиоксидантну ефектом, взаємодіють з системами антимікробної захисту, оберігають мембрани клітин від пероксидного окислення ліпідів еукаріотич...
