віл, відносне утримування і фактор асиметрії.
На хроматографическое поведінку можуть впливати такі фактори, як склад, іонна сила, температура і рН рухомої фази, швидкість потоку, довжина колонки, температура, тиск, а також характеристики нерухомої фази: пористість, розмір часток, питома площа поверхні, а в разі зверненої фази ступінь хімічної модифікації (блокування кінцевих груп, число атомів вуглецю і т.д.).
Різні компоненти використовуваного обладнання повинні бути перевірені на відповідність їх якості і повинні володіти точністю вимірювань необхідної для проведення випробування або кількісного визначення.
Повинні бути дотримані наступні вимоги при відсутності інших вказівок у приватній статті.
Величина фактора асиметрії основного піку повинна знаходитися в межах від 0,8 до 1,5, якщо тільки немає інших вказівок у приватній статті. Ця вимога поширюється як на тести, так і на кількісні визначення, описані в приватних статтях.
Максимальнедопустимий відносне стандартне відхилення для повторних вимірювань для приписаного розчину порівняння не повинно перевищувати величин, наведених у державній фармакопеї. Ця вимога поширюється тільки на кількісне визначення речовини і не використовується в разі проведення випробування на споріднені сполуки.
Межа виявлення піку (відповідний відношенню сигнал/шум рівному 3) знаходиться нижче допустимого вмісту домішки (порога, нижче якого присутність домішки заперечується) в тесті на споріднені сполуки.
- Межа кількісного визначення піку (відповідний відношенню сигнал/шум рівному 10) дорівнює або менше, ніж поріг виявлення домішок (поріг, при якому заперечується присутність домішки) в тесті на споріднені сполуки. Перевірка придатності системи включена для того, щоб гарантувати необхідну поділ для задовільного проведення тесту або кількісного визначення. Неподвижниє фази описані тільки в загальному вигляді, так як існує величезна кількість їх доступних комерційних різновидів, що відрізняються по хроматографічному поведінки і для того, щоб досягти запропонованих вимог придатності системи, у ряді випадків доводиться вносити деякі зміни в хроматографічні умови. У методиках звернено-фазової хроматографії, особливо, регулювання різних параметрів не завжди приводить до задовільного розділенню. У цьому випадку може виникнути необхідність замінити одну колонку інший, що забезпечує бажане хроматографическое поведінку, такого ж типу (наприклад, октадецілсілікагель), але від іншого виробника.
Регулювання критичних параметрів для гарантії придатності системи чітко вказується у приватній статті. Слід уникати множинних змін умов, які можуть надати спільний вплив на ефективність системи.
. Апаратура для рідинної хроматографії
У сучасній рідинної хроматографії використовують прилади різного ступеня складності - від найбільш простих систем, до хроматографов високого класу, забезпечених різними додатковими пристроями. [15]
Рис.1 Блок-схема рідинного хроматографа
- насос призначений для створення постійного потоку розчинника. Його конструкція визначається, насамперед, робочим тиском в системі. Для роботи в діапазоні 10-500 МПа використовуються насоси плунжерного (шприцевого), або пістони типів. Недоліком перших є необхідність періодичних зупинок для заповнення елюентом, а других - велика складність конструкції і, як наслідок, висока ціна. Для простих систем з невисокими робочими тисками 1-5 МПа з успіхом застосовують недорогі перистальтичні насоси, але так як при цьому важко домогтися сталості тиску і швидкості потоку, їх використання обмежене препаративних завданнями.
- інжектор, який би введення проби суміші поділюваних компонентів в колонку з досить високою відтворюваністю (використовують товстостінні скляні колонки).
- термостат забезпечує постоянноство температури.
- детектор (проточна кювета, в якій відбувається безперервне вимірювання якої-небудь властивості протікає елюента).
- реєструюча система (диференційний підсилювач або самописець).
Бажано також наявність інтегратора, що дозволяє розраховувати відносні площі одержуваних піків. У складних хроматографічних системах використовується блок інтерфейсу, що з'єднує хроматограф з персональним комп'ютером, який здійснює не тільки збір та обробку інформації, але і управляє приладом. [15]
. Рідинну колоночную хроматографію
рідинного колоночную хроматографію використовують переважно для виділення і очищення простих ефірів перекисів. Класичну рідинну колоночную хроматографію при низьких тисках і неоднорідних сорбентах використовують...
