олонці TopSpin.
Відкриваємо діалогове вікно BSMSpanel, натискаємо кнопку LIFT. Через кілька секунд лунає шипіння - це з'явилася струмінь повітря, на неї кладемо ампулу із зразком, знові LIFT і ампула опускається на повітряній подушці в центр спектрометра.
Далі налаштовуємо однорідність поля на зразку, для цього потрібна частота резонансу дейтерію в розчиннику. Сигнал дейтерію збирається спеціальним спектрометром спостереження ядер 2 Н, що містяться в приладі, який діє паралельно з основними каналами і називається канал стабілізації поля (lockc hannel). Командою lock, введеної в командний рядок, «чіпляємося» за цей самий сигнал і оптимізуємо (шімміруем) магнітне поле, орієнтуючись на вікно праворуч від основного, де графічно показується стабільність дейтерієвого сигналу. Після натискання кнопки LOCK з'являється список дейтерированного розчинників, з якого потрібно вибрати використовуваний в даному експерименті. Порядок регулювання Шиммі в BSMS вікні:
§ регулюючи Шиммі Z, домогтися максимального рівня стабілізації;
§ змінити Z 2 так, щоб спостерігалося помітне зміна рівня стабілізації (може відбуватися при рух сигналу як вгору, так і вниз), запам'ятати той напрямок, в якому Z 2 змінювався;
§ переналаштувати Z для максимального рівня стабілізації;
§ перевірити більше чи рівень стабілізації, ніж початковий рівень;
§ якщо це так, повторити попередні кроки з регулювання Z 2 поки поліпшення не припиняться. Якщо рівень стабілізації стає нижче, все повторюється, але Z 2 змінюємо в протилежному напрям;
§ оптимізувати Z 3: внести деяку зміну, потім повторити перший пункт. Якщо результат краще, ніж раніше, повторити цю процедуру, якщо ні, змінити Z 3 в протилежному напрямку і повторити перший пункт;
§ оптимізувати XY;
§ оптимізувати X 2 -Y 2 і повторити перший пункт.
Потім необхідно налаштувати датчик, це досягається розгорткою частоти «взад-вперед» (wobble) у вузькій області частот (кілька МГц) біля цільової частоти, протягом якої відгук датчика порівнюється з відгуком внутрішньої еталонної навантаження 50 Ом (всі спектрометри ЯМР налаштовуються по цього стандартного импедансу). Це були найнеобхідніші настройки, далі можна реєструвати спектри.
Але перед цим у вікні Acquisition Parameters потрібно вибрати наступні параметри:
1. імпульсні?? програму - в моїх експериментах використовувалися zg, cosyqf45, zgdc і dept135;
2. тривалість 90 0 імпульсів, створюваних програмами - відповідно 8 мкс (1 Н), 8 мкс (1 Н), 20 мкс (13 С) і 20 мкс (13 С);
. кількість сканів - по одному для перших двох програм і по 40 для решти.
Потім в командний рядок вводимо команду zg, вона очистить пам'ять програми і запише спектр. Після закінчення експерименту на екрані буде видно тільки спад вільної індукції (ССІ), який командою fp перетвориться в звичайний частотний спектр протонів? - Шкалою зрушень у м.д. (мільйонних частках або ppm) знизу. Даємо команду pp - над кожним наявним в спектрі піком з'являється його частота. Далі інтегруємо спектр і роздруковуємо його.
Процедуру повторюємо для запису спектра 13 С з широкосмугової розв'язкою від протонів, тільки вибираємо імпульсну програму zgpg. Для визначення типів вуглеців в спектрах 13 С вибираємо dept135. Для вуглецевих спектрів інтегрування не виготовляємо.
Програма cosyqf45 дає можливість на основі одновимірного протонного спектра зняти двовимірний, де на перетинах взаємодіють один з одним протонів з'являються крос-піки.
3. Результати та обговорення
3.1 Зразок №1
Аналіз структури зразка №1 проводився за спектрами. Для початку по одномерному протонному спектру визначаємо, що в ньому переважають великі значення КССВ (від 8 до 12 Гц) [1]. Це найімовірніше означає, що невідома молекула має своєю основою циклогексанового кільце у формі крісла (Рис. 14) [10].
Малюнок 14 - Конформація крісла
Далі по спектру cosy знайшли номери протонів, так як відомо, що Н 1 в повністю заміщений циклогексанового кільці відповідає дублеті, подальші протони визначаються через недіагональні крос-піки взаємодії [12]. На підставі одновимірних протонного і вуглецевого спектрів побудована таблиця, де виписані зрушення ядер і КССВ (для 1 Н).
Таблиця 2 - КССВ і зрушення для ядер 1 Н і 13 С
Н №?, м.д.КССВ, ГЦС №?, м.д.Н 1 5,163,7С 1 101,297Н 2 4,133,7; 9,6С * 75,292 * Н 3 4,5610,1; 9,273,...
