нтифікація їх не представляється можливою. Також цей тест обмежує суб'єктивна оцінка лікаря-лаборанта. Так, чутливість прямої мікроскопії при грибковому ураженні голови тварини, за даними ряду авторів, варіює від 67 до 91% [31].
З метою підвищення специфічності та чутливості розроблений ряд методик, що дозволяють просто і швидко ідентифікувати різні види мікроміцетів. У мікологічних лабораторіях просвітлення препаратів для мікроскопічного дослідження проводять 15-30% -ним розчином КОН, в який додають 5-10% -ний розчин темно-синіх чорнил фірми «Паркер» (Parkers Superchrome Blue-Black Ink). При цьому методі гіфи й суперечки дерматоміцетів забарвлюються в блакитний колір [25].
Останнім часом розроблений і впроваджений у практику новий метод мікроскопії нативних препаратів із забарвленням калькофлюором білим. Цей реагент як відбілюючого засобу використовується в текстильній і паперовій промисловості. Спільне застосування калькофлюора білого з КОН дозволяє виявляти як молоді, так і зрілі гіфи дерматоміцетів. Застосування методу забарвлення калькофлюором білим при мікроскопічної діагностики дерматомікозів дозволяє на 10% збільшити виявляємість грибкової інфекції в порівнянні зі стандартним КОН-методом. Фарба флуоресціює в ультрафіолетовому світлі (при короткохвильовому опроміненні). Візуалізація проводиться під флуоресцентним мікроскопом [40].
Для фарбування гістологічних зрізів волосся широко застосовують метод PAS (періодична кислотна реакція) фарбування. Останній мало відрізняється від процедури фарбування тканинних зрізів і супроводжується забарвленням певних гліканов (полісахаридів), що знаходяться в клітинній стінці дерматоміцетів. З метою виявлення найбільш інформативного методу діагностики J. Weinberg і співавт. порівняли чотири діагностичні тесту, а саме: мікроскопічний, культуральнийий, метод люмінесцентної мікроскопії з білим калькофлюором і біопсії нігтя. Автори встановили чутливість мікроскопії в 80%, культурального методу в 59% і біопсії нігтя - в 92% в порівнянні з люмінесцентної мікроскопією з білим калькофлюором, який був обраний в якості основного методу. Перевагою всіх перерахованих вище методик мікроскопії є їх швидка і проста техніка проведення, однак вони не дають можливість ідентифікувати вид мікроміцетів [12].
Для встановлення видової приналежності збудника проводиться посів матеріалу на живильне середовище Сабуро з подальшою ідентифікацією виділеної культури. Відомий спосіб виділення дерматоміцетів на щільному середовищі Сабуро з селективними добавками у вигляді пеніциліну (20000 ОД) або стрептоміцину (40000 ОД), гентаміцину (0,005 г/л), левоміцетину (0,16 г/л). Недоліком даної культуральної середовища є повільне зростання виділених культур, що обумовлює тривалі терміни діагностики. З метою скорочення термінів росту культур рядом авторів запропоновані різні модифікації складу середовища Сабуро. Описано спосіб культивування дерматофітів в рідкому середовищі, що містить кератин [28].
з.р. Хісматуллін і співавт. був розроблений спосіб ідентифікації дерматоміцетів з використанням культурального середовища Сабуро з гидролизатом кератину, що дозволяє скоротити терміни виділення грибів з матеріалу хворої тварини. Збільшення швидкості росту культур мікроміцетів відбувається при вмісті в живильному середовищі гідролізату кератину вище 20 г/л. Висів дерматофітів запропонованим способом дозволяє проводити ідентифікацію для Tr. mentagrophytes var. gypseum на 4-5-й день, для Tr. verrucosum - на 7-8-й день [33].
Однією зі спроб удосконалити і забезпечити масову культуральну діагностику дерматоміцетів є розробка тестового середовища для дерматофітів (DTM, delmatophyte test medium), що містить агар Сабуро з антибіотиками, циклогексимідом і індикатором росту культури дерматофітів. Впровадження середовища DTM справило світ концепцію «офісного культивування», при якому з'явилася можливість спостерігати зростання в одноразових чашках не в спеціальній лабораторії, а безпосередньо в кабінеті лікаря-ветеринара, оскільки зростання культури йде при кімнатній температурі [34].
Навіть при дотриманні всіх правил збору матеріалу, за наявності устаткування і високому професіоналізмі співробітників лабораторії число виявлених позитивних результатів культурального дослідження досить невелика. Культуральний метод - це специфічний діагностичний тест, який вимагає до 8 тижнів часу, перш ніж результат буде отримано. Однак при цьому, за даними зарубіжної літератури, частка позитивного культурального дослідження ледве сягає 50%, у вітчизняних дослідженнях збудник не вдається виділити і в 64% випадків. Це обумовлено технічними похибками (порушення правил забору матеріалу, його транспортування і т.д.), але найчастіше - проведенням попередньої (як правило, місцевої) антифунгальной терапії у собак їх власниками. Власники ...
