ія її від кислототривких сапрофітів; в) біологічний метод дослідження (визначення вірулентності).
Виділення чистої культури мікобактерій туберкульозу здійснюють посівом досліджуваного матеріалу на поживні середовища. Слід при цьому мати на увазі, що мокрота, кал і т. п., поряд з туберкульозними мікобактеріями, містять безліч інших мікробів, здатних швидко розмножуватися і пригнічувати ріст збудника туберкульозу. Тому туберкульозний матеріал до бактеріологічного дослідження слід звільнити від супутньої мікрофлори. Для цього користуються двома прийомами. З одного боку, нестерильний патологічний матеріал попередньо (до посіву) обробляють 3-15% розчином сірчаної кислоти з метою знищення сторонніх мікробів, а з іншого - роблять посіви на яєчні середовища (Петраньяні, Любена-Гона, Левенштейна), що містять фарби, що затримують ріст сторонніх мікроорганізмів, але не перешкоджають розмноженню туберкульозних мікобактерій. Виділена на яєчній середовищі культура в подальшому може зберігатися на інших середовищах. Посіви тримають в термостаті при 37-38 В° і спостерігають за появою зростання в протягом 2-3 місяців, відзначаючи час появи перших ознак зростання. З виросли колоній роблять пофарбовані мазки і перевіряють кислото-і спиртостійкі мікробів. Атипові колонії (пігментні, гладкі, швидко зростаючі, легко утворюють суспензію) отвівают на середовища для подальшого вивчення.
При відсутності зростання протягом 8-10 тижнів беруть зішкріб з поверхні середовища і мікроскопією встановлюють наявність або відсутність мікрор. У позитивних випадках готують суспензію з соскоба і ін'іціруют її морським свинкам для визначення вірулентності.
Виділення чистої культури з того чи іншого патологічного матеріалу має свої особливості головним чином в частині попередньої обробки з метою придушення життєдіяльності супутньої мікрофлори. Відповідно до цього наводимо опис, обробки кожного патологічного матеріалу окремо.
Мокроту. Найбільш поширеним методом обробки матеріалу на туберкульоз є метод Гона. При цьому методі мокроту збирають в стерильні баночки в ранкові годинник або протягом доби. Вибирають з неї гнійні частинки. Останні досліджують в забарвлених за Цілем і Грамом мазках. Потім беруть близько 3 мл мокротиння (з гнійними грудочками), додають 6 мл 6-10% розчину сірчаної кислоти, енергійно протягом 10 хвилин струшують до повної гемогенізаціі, потім центрифугують у стерильній центрифужной пробірці, рідину зливають, а осад сіють на яєчні середовища. Дія сірчаної кислоти (з моменту додавання до моменту посіву, включаючи і час центрифугування) має тривати 20 хвилин.
Метод Мазура. У ряд широких пробірок наливають по 3 мл 2-3% розчину сірчаної кислоти. Потім, помістивши в пробірки гнійні грудочки мокротиння, гомогенізують їх, помірно сильно вдаряючи нижніми частинами пробірок про пружні поверхні (долоню, передпліччя, складене на столі рушник) протягом 3 хвилин. При цьому над емульсією мокротиння утворюється товстий шар піни, що містить суміш життєздатних туберкульозних мікобактерій і вбитих сторонніх мікробів. Частина такої піни сіють на яєчну середу.
Обробка гортанного мазка. У дітей та осіб, що не виділяють мокротиння, мікобактерій туберкульозу часто можна виявити в слизу з гортані. Останню знімають ватним тампоном, накрученим на нарізки злегка вигнутого металевого зонда довжиною 20 см і товщиною 1 мм. До вживання зонд з тампоном загортають у папір і стерилізують звичайним способом. Перш ніж взяти мазок, хворому пропонують покашляв і під контролем гортанного дзеркала тампоном знімають слиз з гортані. Потім тампон, знятий із зонда, поміщають в пробірку г 5 мл 6% розчину сірчаної кислоти, сильно протягом 5 хвилин струшують, після чого тампон видаляють стерильним пінцетом, попередньо віджавши з нього рідину в пробірку. Вміст пробірки центрифугують і осад сіють на яєчні середовища. p> Промивні води шлунка. Промивні води шлунка рекомендують дослідити у дітей, які, як правило, не вміють відпльовуватися мокротиння і зазвичай проковтують її, а також у дорослих, що не виділяють мокротиння або виділяють її в незначній кількості. У подібних випадках промивання шлунка та бактеріологічне дослідження осаду з цих вод виявляється найбільш чутливим методом виявлення збудника туберкульозу.
Промивні води отримують за допомогою шлункового зонда у хворих, яким вранці натщесерце дають випити склянку кип'яченої води. Витікаючу через зонд рідина збирають у стерильний посуд. Ці води нейтралізують 20% розчином двовуглекислої соди до нейтральною по лакмусу реакції, відстоюють 1-2 години (або центрифугують) і досліджують гнійні частинки осаду так само, як мокроту.
Обробку і посів промивних вод не слід відкладати, оскільки через 6 годин після взяття матеріалу життєздатність туберкульозних бактерій під впливом шлункового соку помітно слабшає.
Кал. Кал розтирають у стерильній ступці з дестіллірованной водою (5 г калу-f- 10 мл води) і залишають у спокої на 30 хв...
