ща.
Для Приготування розведения беруться ряд пробірок, у Кожній з якіх містіться 9 мл стерільної води чг фізіологічного Розчин. До першої пробіркі вносячи 1 мл досліджуваного матеріалу, ретельно перемішують новою піпеткою Шляхом багаторазове наповнювання піпеткі и переносячи 1 мл до Другої пробіркі (Розведення 10 ~ 2) i т. д. (рис. 1). p>В
Існує кілька методів визначення загально мікробного числа: метод прямого підрахунку и метод кількісного посіву різніх розведения зразків и проб досліджуваного об'єкта.
Прямій Підрахунок мікроорганізмів у досліджуваному об'єкті проводитися под мікроскопом у рахувальніх камерах Горяєва чи в камерах, спеціально сконструйованіх для підрахунку бактерій. За помощью цього методу візначають Загальну кількість живих та мертвих клітін. Завчасно, досліджувану пробу обробляють так, щоб здобудуть гомогенного суспензію. Для полегшення підрахунку бактерій додаються барвник, частіше за все ерітрозін. Можна Здійснювати прямий Підрахунок и на мембранних фільтрах, через Які пропускають Речовини чг суспензію. Застосовується ВІН у НАДЗВИЧАЙНИХ випадка, коли потрібна негайна відповідь відносно кількісного вмісту бактерій, Наприклад, при аваріях систем водопостачання, оцінці ефектівності роботи очисних споруд ТОЩО. Метод простий и Доступна для Використання в санітарно-бактеріологічніх лабораторіях, протікання має ряд недоліків. За йо помощью Важко відрізніті мікроорганізмі від сторонніх часток, точно візначіті кількість мікроорганізмів, оскількі смороду часто утворюють Великі скупчення (конгломератів), Неможливо діференціюваті живі мікроорганізмі та мертві, санітарне Значення якіх неоднакове, Важко підрахуваті дрібні мікроорганізмі.
Метод кількісного посіву досліджуваного матеріалу на Щільні Поживні середовища дозволяє підраховуваті живі мікроорганізмі. При візначенні мікробного числа віявляють, в основному, колонії мезофільніх аеробних и факультативно-анаеробних бактерій, здатн розмножуватіся на МПА, тоб використовуват білок І продукту его розщеплення як джерело азотного живлення. Ці мікроорганізмі є Основними Споживача органічніх Речовини, Які вносяться до грунту та води з різнімі відходамі промислових підпріємств, віділеннямі людей.
Посів за методом Коха вікорістовується для визначення Загальної кількості бактерій. У порожню стерильні чашки Петрі налівають 1 мл досліджуваного матеріалу з відповідного розведення и заливають 10-15 мл розплавленого, охолодженя до 45 В° З МПА, змішують з рідіною, обертаючі чашку на поверхні столу. После застігання агару чашку перевертають кришкою вниз, культівують при 37 В° С Протяг 24-48 годин чі при 22 В° - 72 години.
Колонії підраховують як на поверхні, так и в товщі агару, для чого чашку кладуть догори дном на чорний фон. Шкірні колонію відмічають чорнилами. Оцінюють Тільки ті чашки, на якіх виросло від ЗО до 300 колоній. Если на чашці з найбільшім розведения виросло прежде 300 колоній и аналіз НЕ можна повторити, то допускається підрахування колоній при сильному бічному освітленні помощью спеціальної пластинки з сіткою та лупи. Підраховується кількість не менше чем у 20 квадратах площею 1 см2 у різніх місцях чашки. Розраховується середня кількість колоній у 1 см2, якові помножують на площу чашки.
У результаті підрахунку колоній у Кожній чашці візначають кількість бактерій на 1 мл (1 г) досліджуваного матеріалу з урахуванням розведення. За кількість бактерій пріймають середнє Арифметичний результатів підрахунку колоній на чашках з посівом двох сусідніх розведения.
Наприклад: розведення 101-310 колоній, розведення 10 ~ 2-35 колоній.
Загальна кількість бактерій - 310 * 10 +35 x100
Результат Дослідження можна округліті до 2-3 значущих цифр (Наприклад, 7989 до 8000).
Тітраційній метод вікорістовується для визначення кількості санітарно-Показове мікроорганізмів. Суть его Полягає в Наступний:
- досліджуваній материал гомогенізують, при дослідженні твердих Речовини готують суспензію;
- готують Серії розведения;
- роблять посів визначених об'ємів и їхніх розведения (по 1 мл) до рідкого пожівного середовища. Коженая об'єм нужно засіваті в декілька пробірок (2-х, 3-х, 4-х, 5-ти і т. д. рядні посіви). Оптимальним є 3-х рядний посів (Трикратне повторення);
- відмічають наявність росту на рідкому пожівному середовіщі та вісівають Із пробірок, в якіх відмічено ріст, на щільне пожівне середовище;
- проводять ідентіфікацію мікроорганізмів, Які виросло на щільному середовіщі. Враховуються морфологічні, тінкторіальні, культуральні, фізіолого-біохімічні Властивості.
Если застосовувався однорядний метод, результат віражається у вігляді титру - найменшого об'єму, в якому знайдено досліджуваній організм (найбільше розведення).
Если застосовувався багаторядній метод, результати підраховують за помощью спеціальніх таблицю, котрі дозволяють за комбінацією позитивних...
