ліпіди Суданом чорним В, залізо забарвленням по Перлсу. Крім того, проводили забарвлення хроматофільной речовини і ядер нервових клітин по Нісль. Виконували гістологічне дослідження виготовлених препаратів з докладним протоколированием і фотографуванням ділянок з відхиленнями від норми. p> Крім того, вивчали патоморфологічні зміни в органах при експериментальному зараженні тварин і можливість виникнення змін в хромосомному апараті кроликів, під впливом грибів Aspergillus, Candida, Mucor і Nocardia на хромосомний апарат піддослідних тварин шляхом каріологіческій аналізу клітин червоного кісткового мозку, що знаходяться в стадії метафази. p> В експерименті було використано 45 кролів породи радянська шиншила у віці 5 місяців, відібраних за методом аналогів, враховуючи такі показники, як порода, стать, вік, маса тіла, умови годівлі та утримання.
Було проведено чотири досвіду з вивчення впливу дії грибів Aspergillus, Candida, Mucor і Nocardia на тварин. p> Контролем служили дорослі кролики того ж віку.
Зараження проходило при введенні у вушну вену суспензії конідій гриба, виділених з уражених органів спонтанно захворілих і полеглих тварин.
Кістковий мозок отримували з трубчастих кісток стегна і гомілки безпосередньо перед забоєм.
Приготування препарату для хромосомного аналізу здійснювали за методом С.С. Бірбіна (1970). p> 1. У 10 мл розчину Хенкса (без бікарбонату), підігрітого до 38 В° С, що містить 0,1 мг колхіцину, 300 ОД гепарину, 0,6 мл буферного двоосновного фосфату натрію, вносили 0,5 - 1,0 мл кісткового мозку, наготовлювали суспензію, інкубували її 30 - 60 хвилин при температурі 38 В° С. Потім центрифугували 10 хвилин при 1000 оборотів в хвилину. Супернатант обережно видаляли. p> 2. До отриманого осадку додавали 10 мл 0,9% розчину лімоннокіслого натру підігрітого до 38 В° С, осад збирали піпеткою і поміщали в термостат при температурі 2 градуси за Цельсієм. Потім пробірки ставили в центрифугу на 15 хвилин при 1000 оборотах на хвилину. Супернатант видаляли. p> 3. До осаду по стінці обережно додавали 1,5 - 3,0 мл свіжоприготованого охолодженого до 4 В° С фіксатора, що складається з трьох частин метанолу і однієї частини крижаної оцтової кислоти. Осад, що не струшуючи, витримували в фіксаторі 10 хвилин, рідину обережно видаляли, а осад суспендованих новою порцією фіксатора. Пробірки поміщали в холодильник на 30 - 60 хвилин, після чого суспензію центрифугували 3 хвилини при 800 оборотів в хвилину. Супернатант видаляли, пробірки перекидали для кращого стікання фіксатора. Зі стінок пробірок залишки рідини знімали ватним тампоном.
4. Осад суспендованих у новій порції фіксатора, центрифугували 3 хвилини при 800 оборотів в хвилину і супернатант видаляли. Аналогічну маніпуляцію повторили двічі. p> 5. До осаду додали нову порцію фіксатора, рівномірно суспендованих і готували препарати шляхом випалювання фіксатора. Для цього на предметне скло наносили 2 - 3 краплі суспензії і після незначного розтікання її підпалювали від полум'я спиртівки. p> Препарати фарбували АЗУР - Еозином по Нохта. p> У робочий розчин на 100 мл дистильованої води додавали 1 мл буферного розчину двоосновного фосфату натрію (18,814 г фосфату на 100 мл води). Препарати проводили через ксилол і укладали в канадський бальзам.
Для перегляду метафазних пластинок з діляться клітин кісткового мозку використовували мале збільшення мікроскопа. Їх аналіз проводили під іммерсіей: враховували розміри, форму хромосом, розташування центромер, підраховували кількість хромосом. Всього проаналізовано 100 метафазних пластинок від контрольних і піддослідних тварин.
Для вивчення чутливості курчат до грибів Candida, виділених з уражених органів і фекалій хворих на кандидоз телят, було поставлено декілька дослідів на 114 курчатах.
Досвід № 1. Зараження культурою Candida albicans, виділеної з ураженого рубця теля віком 14 днів. p> Культуру у вигляді суспензії Випоюють 2-х денним курчатам 1 раз на добу 5 днів поспіль. Частина курчат вбивали через кожні 2 дні.
Досвід № 2. Зараження декількома штамами грибів Candida, з яких були: C. albicans, C. krusei, C. parakrusei, C. рseudotropicalis, C. tenuis, виділені з фекалій телят.
заражали 5 груп курчат окремо кожним штамом, згодовували заражений корм в окремих годівницях, але годували і містили в одному місці.
Досвід № 3. Зараження поєднанням грибів Candida albicans і Aspergillus fumigatus, виділених з ураженого рубця (Candida) і легень (Aspergillus fumigatus) поваленого теляти.
заражали 3 групи курчат. Одній групі Випоюють суспензію Candida albicans, другий - Aspergillus fumigatus і третьої - поєднання цих двох видів грибів.
При підозрі на кандидоз висіву фекалій робили за допомогою шпателя, розтираючи матеріал по поверхні пластинчастого агару. Але цей метод не виявився прийнятним при висіву фекалій телят з підозрою на ураження пліснявими грибами. Ці види грибів зазвичай...
