скла повинні бути вимиті і знежирені сумішшю Нікіфорова, підігріті до +25 0 C. Крім того, рекомендується наносити частина матеріалу і на звичайні предметні скла, оброблені таким же чином. Справа в тому, що досвідчений лікар-лаборант при огляді нативного препарату сперми на звичайному предметному склі може з великою часткою достовірності визначити основні показники спермограми.
Після повного розрідження еякулят розводять фізіологічним розчином також кімнатної температури в співвідношенні 5:1. Іноді розведення збільшують, особливо якщо мається молочно-білий колір еякулята. Отриманий матеріал кілька разів обережно набирають і спорожняють в піпетку. Далі краплю еякулята підводять під покривне скло. Матеріал повинен рівномірно розподілитися по всій камері. Після чого необхідна стабілізація препарату. Для цього протягом 1 - 2 хвилин його залишають на предметному столі мікроскопа. Рекомендується використовувати предметний столик мікроскопа з підігрівом до +37 0 C. У разі, якщо цього немає, можливо перемістити приготовлену і заправлену еякулятом камеру в термостат на 15 хвилин при тій же температурі. Після цього переходять безпосередньо до мікроскопії.
Дослідження не викликає складнощів, якщо у великому квадраті камери Горяєва розташоване не менше 30 - 40 сперматозоїдів. Якщо це число більше 150 - 200, то рекомендується збільшити розведення в 2, а іноді і в 3 рази.
Якщо ж навпаки клітинних елементів занадто мало, то тоді виконується центрифугування еякулята. Надлишки рідини видаляють піпеткою. Слід зауважити, що можливо деяка зміна морфології в гіршу сторону при проведенні центрифугування.
Для оцінки достовірності отриманого результату досліджують другий препарат. Підрахунок ведеться, досліджуючи близько 200 - 300 клітин. При підрахунку 50 клітин результат вважається статистично недостовірним, якщо різниця між двома дослідженнями становить менше 5 клітин. При підрахунку 100 клітин це значення дорівнює 7. І при підрахунку 250 клітин - 9.
Під час проведення мікроскопічного сперміологіческого обстеження визначаються наступні параметри:
1. Визначення кількості сперматозоїдів. p> 2. Оцінка рухливості сперматозоїдів.
3. Оцінка життєздатності сперматозоїдів.
4. Оцінка морфології сперматозоїдів.
5. Дослідження В«круглихВ» клітин. p> 6. Визначення аглютинації сперматозоїдів. p> 7. Оцінка неклітинних структур.
Визначення кількості сперматозоїдів
Визначення кількості сперматозоїдів виконується при мікроскопії препарату в рахунковій камері. Для того, щоб рухи сперматозоїдів не викликали технічних складнощів, необхідно провести їх знерухомлення. Для цього використовується розчин, який містить 50 грам бікарбонату соди (NaHCO3), 10 мл 35% розчину формаліну, розведеного в 1 літрі води. Це рекомендація ВООЗ. Знерухомлення відбувається в камері Горяєва. Також можливо використовувати один препарат для оцінки рухливості спер...
