. Принцип поділу такий же, як в інших видах хроматографії, - неоднакове спорідненість поділюваних органічних речовин до рухомої рідкій фазі і стаціонарного сорбенту. Після досягнення розчинником (елюентом) лінії фінішу платівку висушують і проводять ідентифікацію компонентів. Розділені компоненти на платівці чи смужці паперу утворюють окремі зони (плями). Багато речовин не виявляються у видимій області, і для їх визначення невидимі зони проявляють обприскуванням пластини ТШХ спеціальними реагентами. Для виявлення плям можна використовувати УФ-випромінювання або термічну деструкцію речовин.
Важливою характеристикою ступеня поділу визначаються сполук у планарною хроматографії є ​​величина Rf - відношення відстані від центру плями на платівці до лінії старту (х) до відстані (у), пройденого розчинником від лінії старту до фінішу. Величина Rf є характеристикою природи обумовленого з'єднання і залежить від сорбенту, розчинника, використовуваних для поділу. Для надійності ідентифікації речовин при визначенні Rf часто використовують "свідки". Для цього на платівці разом з розділяється сумішшю речовин хроматографіруют стандартні речовини ("свідки").
Правильний вибір сорбенту і розчинника (суміші розчинників) визначає ефективність (Повноту) поділу. Вибір хроматографічної системи визначається природою аналізованої суміші. Наприклад, насичені вуглеводні сорбуються в дуже малою мірою і тому рухаються в ньому з більш високою швидкістю. Ненасичені вуглеводні сорбуються тим сильніше, чим більше в них міститься подвійних зв'язків. Для їх поділу слід використовувати найбільш активні сорбенти і малополярние розчинники. Для органічних речовин, що містять різні функціональні групи, адсорбційне спорідненість підвищується в наступному ряду:-СН3 ,-О-аlk,> С = О,-NH2,-ОН,-СООН. Це призводить до того, що на шарах силікагелю або окису алюмінію при застосуванні в якості розчинника, наприклад бензолу, прості або складні ефіри розташовуються у верхній частині хроматограми, кетони і альдегіди - приблизно в середині, спирти - ближче до лінії старту, а кислоти залишаються на старті.
Розчинники різної природи, використовувані в ТШХ, розрізняються за їх елююють (Витискної) дії, і їх можна розташувати в так звані елюотропние ряди. Спостерігається очевидна залежність між полярністю і елююють дією розчинника. Наприклад, елюотропний ряд для силікагелю в міру зростання елююють здатності виглядає наступним чином: н-гексан, пентан, циклогексан, чотирихлористий вуглець, толуол, хлороформ, діхлорметан, діетиловий ефір, оцтова кислота, етанол, метанол, піридин, вода.
Методи обробки хроматограм. Для отримання інформації про якісний і кількісному складі аналізованої суміші використовують різні методи детектування - як хімічні, так і фізичні. В останні роки значно зросло використання ферментативних методів, особливо в клінічній діагностиці, при визначенні пестицидів. Пластинки ТШХ виконують роль дискет, з яких хімічна, фізична ...
