50
2
1.9
0.9 0.7 0.5 0.5 1.1 0.6 0.3 0.3 0.1
У іонообмінної хроматографії на ступінь утримування впливають три чинники: ступінь іонізації кислот і підстав, заряд іонізованої молекули і здатність речовини з водної рухомої фази, використовуваної в іонообмінної хроматографії, мігрувати в органічну фазу. Останнє залежить від молекулярної маси з'єднання і його гідрофобності. Отже, більш сильні кислоти або підстави сильніше утримуються при аніонообмінної або Катіонообменная поділі. При зниженні р КО± окремої кислоти, що входить в зразок, утримування зростає при поділі ряду кислот за рахунок аніонного обміну, а при збільшенні р КО± збільшується утримування підстав при їх поділі за рахунок катіонного обміну. ​​
Таким чином, збіг значень часу утримування відомого речовини з спостережуваним дає можливість припустити їх ідентичність. Достовірність ідентифікації зростає, якщо проводити порівняння хроматограм відомого речовини та невідомого компонента в різних умовах. Якщо речовини в адсорбційної і обернено-фазною або ионнообменной і ексклюзіонной хроматографії поводяться однаково, надійність ідентифікації зростає. Якщо достовірність ідентифікації при рівності відносного утримування становить 90%, то при вивченні поведінки цих же речовин в умовах істотно що відрізняються достовірність ідентифікації складає вже 99%.
Цінною характеристикою речовини, що застосовується при ідентифікації, є ставлення сигналів, отриманих для даної речовини на двох різних детекторах. Аналізоване речовина після виходу з колонки проходить спочатку через перший детектор, потім через другий, а сигнали, що надходять з детекторів, реєструються одночасно за допомогою многоперьевого самописця або на двох самописцях. Зазвичай застосовують послідовне з'єднання ультрафіолетового детектора (більше чутливого, але селективного) з рефрактометром, або ультрафіолетового з детектором з флуоресценції, або двох ультрафіолетових детекторів, що працюють на різних довжинах хвиль. Відносний відгук, тобто відношення сигналу рефрактометра до сигналу фотометра, є характеристикою речовини за умови, що обидва детектора працюють у своєму лінійному діапазоні; це перевіряється введенням різних кількостей одного і того ж речовини. Якісну інформацію можна отримати, працюючи на фотометричних детекторах, забезпечених пристроєм для зупинки потоку (Stop flow) і дозволяють реєструвати спектр виходить з колонки піку, поки він знаходиться в проточній кюветі, порівнюючи його зі спектром відомого з'єднання.
Значний інтерес при ідентифікації представляють сучасні, поки ще дорогі, спектрофотометри з діодним гратами.
Абсолютно невідому речовину неможливо ідентифікувати тільки за допомогою високоефективної рідинної хроматографії, необхідні й інші методи.
ІДЕНТИФІКАЦІЯ РЕЧОВИН НЕХРОМАТОГРАФІЧЕСКІМІ МЕТОДАМИ
У деяких випадках ідентифікація не...