відомої речовини може бути забезпечена збором фракції, відповідної піку хроматографічного розділення, і подальшим аналізом цієї фракції фізичними або хімічними методами. При цьому рухлива і нерухома хроматографічні фази повинні бути очищеними, щоб фон від фази був зведений до мінімуму, вони не повинні вступати в хімічну реакцію з розчиненим речовиною, повинні бути сумісними-з хроматографічної системою, яка використовується для розділення і виявлення піку. Нерухома фаза НЕ повинна виноситися з колонки. Крім того, обидві фази не повинні заважати ідентифікації допоміжними методами і бути летючими, щоб їх можна було легко видалити виправними, фракції зазвичай збирають вручну, хоча можливо застосування колектора фракцій. Для забезпечення чистоти, відповідної піку збираної фракції, внутрішній об'єм трубки між детектором і виходом каналу для збору фракцій повинен бути мінімальним. Цей обсяг повинен бути виміряний і внесені поправки на затримку між реєстрацією піку детектором і фактичним виходом піку з каналу для збору фракцій. Фракції зручно збирати в чисті, сухі, захищені від попадання світла посудини з нагвинчують кришками і тефлоновими прокладками щоб уникнути забруднень. Можливий барботаж цих фракцій чистим азотом або гелієм. Розчинники видаляють із зразка виправними, продувкою газом, нагріванням ІЧ-лампою. Воду і суміші органічних розчинників з водою видаляють випарюванням або ліофільної сушкою. Летючі буферні з'єднання видаляють при підвищених температурах.
Мас-спектрометрія - Найбільш надійний і повний метод визначення структури речовини, молекулярної маси, його хімічної формули. Цей високочутливий метод дозволяє працювати всього з 0,005 мкг речовини і встановити як фрагментарний склад молекули, так і її елементне будову.
Розгляд ідентифікації невідомих речовин за допомогою мас-спектрометрії не входить до завдання даного видання. Слід зазначити, однак, що більшість неіонних, навіть відносно малолетучих речовин вдається проаналізувати, використовуючи зазвичай застосовуваний у мас-спектрометрії метод збудження електронним ударом. Нелеткі або іонні з'єднання визначають при використанні методів хімічної іонізації, польовий десорбції та інших спеціальних прийомів.
Зразок, попередньо упаренний до 1-2 крапель (обсяг 25-50 мкл), переносять мікрошприцем у вхідний зонд мас-спектрометра, повільно випарюють і аналізують. При цьому необхідно виконувати холості досліди, відбираючи аналогічну фракцію до виходу даного нас піку, упаривая її і вводячи в мас-спектрограф, щоб переконатися у відсутності фонових домішок, які можуть дати значні піки і заважати правильної ідентифікації.
Для спектрального аналізу в інфрачервоній області потрібно відносно невелика проба - 5 мкг в твердому вигляді і 50 мкг в розчині. Чутливість підвищується при використанні методів, заснованих на перетворенні Фур'є, при цьому достатньо всього 0,05 мкг проби. Цей метод аналізу чудово доповнює дані, отримані на мас-спектромет...
