хомої фази різко збільшують. Концентрування на колонці дозволяє в деяких випадках вводити 1 л і більше зразка при кінцевому об'ємі зони цікавить нас речовини менше 50 мкл (градієнтне елюювання), тобто концентрувати речовина в 20 000 разів. Можна підвищити чутливість виявлення, проводячи концентрування зразка і поза колонки, наприклад, випарівая розчинник. Однак треба бути впевненим, що при цьому не відбувається втрата або видозміна домішок. Крім того, при такому процесі значно підвищиться вміст основних компонентів у зразку, що призведе до перевантаження по них колонки і утруднить аналіз. Речовини, утримувані сильніше, ніж домішки, можуть бути після аналізу, видалені з колонки не тільки за рахунок підвищення сили розчинника, а й шляхом зворотного промивання колонки.
Роздільна здатність колонки
Іноді вдається провести поділ на зверненої фазі таким чином, що основні компоненти зразка елюіруются з часом, близьким до t0, а микропримеси утримуються на колонці, що полегшує їх кількісне визначення. Оцінка змісту микропримеси найбільш надійна, коли її пік реєструється до піку переважаючого в зразку компонента. Елюювання піку микропримеси на хвості переважаючого компонента сильно погіршує її кількісне визначення. Будь-яке хроматографічне розділення на колонці призводить до розбавлення зразка. При аналізі мікродомішок виникає проблема поділу при мінімальному розведенні. Ступінь розведення введеного зразка може бути виражена рівнянням
В
З макс/ З 0 = VsN 0,5 /[Vr (2ПЂ) 0,5 ],
де З макс - Концентрація, відповідна максимуму піку; С0 - вихідна концентрація у зразку; Vs - об'єм, що вводиться; N - число теоретичних тарілок для даної колонки; Vr - утримуваний обсяг микропримеси.
З рівняння видно, що зниження ступеня розбавлення. а значить, збільшення чутливості визначення микропримеси можна досягти за рахунок збільшення вводиться обсягу, ^ Використання колонки з великим числом теоретичних тарілок або за рахунок зниження обсягу утримування микропримеси. До збільшення N веде застосування ефективних колонок, заповнених частинками з розміром менше 10 мкм. При аналізі мікродомішок бажано застосування коротких колонок (5-10 см) з розміром частинок 3-5 мкм.
Великий вплив при аналізі мікродомішок надає зміна селективності системи та підвищення коефіцієнта поділу а , що досягається зміною складу рухомий фази і вибором оптимального хроматографічного режиму. Крім того, як видно з рівняння
В
C макc/ З 0 = (О±-1)/О±
зміна селективності може значно знизити ступінь розведення піку.
Детектори
При аналізі мікродомішок працюють з селективними детекторами, чутливими до цікавого речовині. Гранична чутливість детектора залежить від відношення сигналу до шуму самого детектора і від його здатності реагувати на микропримеси у зр...
